4T1乳腺癌转移模型的培养特性与传代方法

关键词：4T1细胞，乳腺癌转移，细胞培养

做乳腺癌转移、免疫治疗或者肿瘤微环境方向的同学，4T1 是高频出现的一株。它的牛点在于能自发高转移，打到 BALB/c 小鼠里不用摘原发灶就能转移到肺、肝、淋巴结和脑，特别像人Ⅳ期乳腺癌。

4T1 是小鼠乳腺癌细胞，从 410.4 瘤株中筛得的 6-硫鸟嘌呤抗性株。它的转移特性与人体乳腺癌很接近，可做术后和未手术模型；因为抗 6-硫鸟嘌呤，微小转移团（少到 1 个细胞）也能在远端器官检出，不用称重器官。可用于 3D 培养。

细胞背景与来源

来源：小鼠（BALB/c 背景），乳腺癌（410.4 瘤株衍生的抗性株）。贴壁生长，贴壁偏紧。

应用场景与研究价值 

• 肿瘤转移：乳腺癌自发性肺、肝、淋巴结、脑转移的动物模型。
• 免疫肿瘤学：肿瘤免疫微环境、免疫治疗评价。
• 术后/未手术模型：转移动力学研究。

培养特性与注意事项

培养基：RPMI 1640 + 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。贴壁，生长较慢，接种密度别太低，推荐 1:2。

传代：PBS 润洗后胰酶 37℃ 消化，参考 5-15 min（贴壁偏紧），部分脱落时先用胰酶吹下再加培养基终止，1000 rpm 离心 3 min。换液 2 天一次。

冻存：92% FBS + 8% DMSO（或 92% 完全培养基 + 8% DMSO），程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏：37℃ 水浴 2 min 内，150g 离心 2 min。生物安全：BSL-1。

注意：消化时间偏长，种得越久、密度越大越难消化，别硬吹；背景黑点是代谢产物和碎片，多了 PBS 润洗或换液即可。

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