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CD3分选试剂盒哪个好?FiniGet分必得®实测纯度数据与多品牌对比

浏览次数:40 发布日期:2026-7-30  来源:信天翁生物
前言

CD3细胞分选、T细胞分选是免疫、肿瘤基础研究常用的原代细胞分离手段。FiniGet分必得®120-6001人CD3+T细胞负选试剂盒采用阴性分选技术,15分钟即可获得纯化T细胞,大限度避免目标细胞激活,适配细胞培养、分子检测、流式分析等各类下游实验。

我们整理了广东省内三甲医院、高校、重点实验室完成的部分代表性细胞分选Demo实验记录,所有操作严格遵循试剂盒官方说明书,每组实验都配套专属原始流式检测结果图,能直观看到不同样本条件下,使用FiniGet分必得®完成CD3分选后的纯度表现。文中同时收录多品牌平行对照实验数据,华南地区做免疫课题的科研人员,可借助这批可视化、可溯源的实测数据挑选适配的CD3分选试剂盒。

FiniGet分必得®人CD3+ T细胞分选试剂盒
一、实验基础信息

1. 分选试剂:FiniGet分必得®120-6001人CD3+T细胞负选试剂盒,也可以使用小规格型号120-6001-S

2. 分选原理:Cocktail会特异性结合非CD3杂细胞,再通过链霉亲和素磁珠吸附带走杂细胞,直接收集流出液即可得到高纯度CD3+T细胞,大限度避免目标细胞激活。

3. 配套磁力设备:FiniGet分必得®140-2000单孔磁力架、140-2002八联排磁力架,可适配不同细胞处理体量。

4. 鉴定抗体:FITC Mouse Anti-human CD3抗体(OKT-3、UCHT1两种克隆),用于流式上机检测分选纯度。

5. 测试样本:新鲜人PBMC、冻存复苏PBMC、全血裂红后单个核细胞

6. 统一操作规范:按照说明书完成PBMC制备、抗体孵育、磁珠结合、磁力分离全流程;冻存细胞分选前用DNase I打散细胞团块;红细胞含量偏高的样本,同步执行标准裂红步骤。

官方标准流式参考图

下图是使用本产品进行流式检测的结果,分选前PBMC中CD3阳性细胞占比60.4%,使用FiniGet分必得®完成CD3分选后,纯度达98.5%,可以作为CD3细胞分选的参照标准。

人 PBMC 分选 CD3+ T 细胞流式效果 Before isolation 60.4% After isolation 98.5%
二、广东地区实验室实测纯度汇总

 

序号 客户 样本类型 分选前CD3占比 分选后纯度 实验特殊条件
1 祈福医院 C老师 新鲜PBMC 76.47% 99.00% 标准试剂用量,样本无红细胞残留
2 深圳工业 新鲜PBMC — 95.00% 平行对比S品牌,S品牌纯度94%-95%
3 深圳工业 PBMC混样 68.75% 99.35% NeoMab CD3抗体上机鉴定分选纯度
4 中山大学附属第八医院 S老师 裂红后PBMC 70.00% 98.30% 样本红细胞富集,常温裂红3分钟处理
5 南方医科大学珠江医院 L老师 新鲜PBMC 72.00% 98.92% PBMC存在50%红细胞残留,对分选纯度无明显影响
6 合作实验室 冻存PBMC ~60% 99.45% 冻存细胞复苏后活性优异,分选效果稳定
7 合作实验室 冻存PBMC 85.00% 96.00% 设置平行实验组,验证分选重复性
8 混合全血样本实验室 低温Ficoll分离PBMC 65.80% 97.20% 样本血小板富集,低速离心预处理后分选
9 中科院深圳院 W老师 冻存PBMC 活率95% 99.00% 平行对比N品牌,另一N品牌纯度95%
10 广东省人民医院 H老师 新鲜PBMC 60.00% 96.21% 对标S品牌,S品牌纯度89%,样本含大量血小板
11 深圳湾实验室 P老师 冻存复苏PBMC 63.00% 98.01% 分选后细胞整体活性高于95%
三、不同样本分选效果分析
3.1 新鲜人PBMC细胞分选效果

广东多家医院客户新鲜外周血分离PBMC后直接开展CD3分选,搭配FiniGet分必得®标准试剂配比,T细胞分选后流式纯度稳定维持97%~99.4%。

如果样本混杂大量血小板、红细胞,CD3分选纯度会小幅回落,按照说明书配套裂红流程预处理后,纯度可恢复至98%以上。

实验1:祈福医院C老师——新鲜PBMC分选前后流式对比

祈福医院C老师使用FiniGet分必得人CD3+T细胞分选试剂盒,分选后纯度99%

实验3:深圳工业——PBMC混样分选流式图(NeoMab CD3抗体鉴定)

深圳工业客户使用FiniGet分必得人CD3+T细胞分选试剂盒,分选后纯度99.35%

实验5:南方医科大学珠江医院L老师——新鲜PBMC分选流式图(50%红细胞残留)

南方医科大学珠江医院L老师使用FiniGet分必得人CD3+T细胞分选试剂盒,分选后纯度98.92%

实验10:广东省人民医院H老师——新鲜PBMC分选流式图(高血小板样本)

广东省人民医院H老师使用FiniGet分必得人CD3+T细胞分选试剂盒,分选后纯度96.21%
3.2 冻存PBMC分选稳定性

冻存PBMC复苏后容易形成细胞团块,也是干扰T细胞分选纯度的常见问题。严格跟着试剂盒说明书操作,用100μg/mL DNase I室温孵育15分钟并过筛后,再用FiniGet分必得®开展分选,试剂盒分选效果受冻存周期影响较小。

冻存样本经过CD3分选,纯度稳定在96%~99.45%区间,仅细胞活性会随冻存时长轻微下降,对CD3阳性细胞富集无明显影响。

实验6:合作实验室——冻存PBMC分选流式图(复苏后活性优异)

合作实验室——冻存PBMC分选流式图(复苏后活性优异)

实验7:合作实验室——冻存PBMC技术重复流式图(验证分选重复性)

合作实验室——冻存PBMC技术重复流式图(验证分选重复性)

实验11:深圳湾实验室P老师——冻存复苏PBMC分选流式图(分选后活性>95%)

深圳湾实验室P老师使用FiniGet分必得人CD3+T细胞分选试剂盒,分选后纯度98.1%
3.3 高红细胞与高血小板样本分选优化方案

中山大学附属第八医院的客户实测发现,红细胞污染严重会吸附磁珠,直接拉低FiniGet分必得®CD3分选纯度。

推荐标准化优化操作:取1mL专用裂红试剂重悬细胞,室温孵育3分钟,PBS洗涤一次后再孵育抗体、磁珠,即可有效消除红细胞干扰。

实验4:中山大学附属第八医院S老师——裂红/未裂红CD3分选对照流式图

中山大学附属第八医院S老师使用FiniGet分必得人CD3+T细胞分选试剂盒,分选后纯度98.3%

 

四、多品牌平行分选对比

在多组实验中,我们同步设置某进口品牌、另一国产品牌的平行对照组,采用同等细胞量、统一操作流程,直接对比CD3分选纯度表现。以下为汇总对比数据:

实验编号 样本条件 FiniGet分必得® 对比品牌 对比品牌纯度 纯度差距
实验2 新鲜PBMC(标准样本) 95.00% S品牌 94%-95% FiniGet分必得® 高 0-1%
实验10 新鲜PBMC(高血小板样本) 96.21% S品牌 89.00% FiniGet分必得® 高 7%
实验9 冻存PBMC 99.00% N品牌 95.00% FiniGet分必得® 高 4%
4.1 与某进口品牌对比

实验2中,深圳工业使用同一批新鲜PBMC设置平行对照,FiniGet分必得®分选纯度95.00%,某进口品牌纯度94%-95%,两者在标准样本条件下纯度接近。

实验10中,广东省人民医院H老师的样本含有大量血小板,属于高干扰条件。FiniGet分必得®分选纯度96.21%,某进口品牌仅89.00%,差距达7个百分点。在血小板富集等复杂样本条件下,FiniGet分必得®的杂细胞清除能力优势明显。

4.2 与另一国产品牌对比

实验9中,中科院深圳院W老师使用冻存PBMC开展平行对照,FiniGet分必得®分选纯度99.00%,另一N品牌纯度95.00%,差距4个百分点。在冻存样本条件下,FiniGet分必得®的纯度稳定性更突出。

4.3 选型建议

综合多组平行对比数据,在标准新鲜PBMC样本中,FiniGet分必得®与某S品牌纯度接近;在高血小板、冻存复苏等复杂样本条件下,FiniGet分必得®的纯度优势更为显著。

如需了解FiniGet分必得®完整产品线(人CD3/CD4/CD8/CD19/CD56分选试剂盒、磁力架、分选缓冲液),可访问FiniGet分必得®品牌专区;如需了解更多细胞分选技术方案与实验案例,可浏览技术专题页。

 

五、FiniGet分必得®120-6001标准化细胞分选操作方案
方案A:140-2000单孔磁力架(5mL流式管,大处理2×10⁸细胞)

1. PBMC制备:Ficoll密度梯度离心分离外周血单个核细胞,PBS洗涤沉淀,重悬于FiniGet分必得®专用分选缓冲液,调整细胞密度至1×10⁸ cells/mL;冻存PBMC需DNase I打散团块+40μm细胞筛过滤。

2. 抗体孵育:每1×10⁷细胞添加10μL分选cocktail,轻柔混匀,室温孵育10分钟。

3. 磁珠孵育:每1×10⁷细胞添加8μL充分涡旋混匀的链霉亲和素磁珠,室温孵育2.5分钟。

4. 磁力分离:分选缓冲液补至2.5mL,流式管放置磁力架静置2.5分钟,平稳倾倒上清,流出液即为纯化CD3+T细胞。

5. 细胞重悬:按需洗涤细胞后,重悬于培养基或实验缓冲液,直接开展下游实验。

方案B:140-2002八联排磁力架(5mL流式管)

整体流程和方案A保持一致,磁力吸附静置时长调整为5分钟,用移液器吸取上清,不要直接倾倒流式管。

方案C:140-2002八联排磁力架(14mL大体积流式管,大处理8×10⁸细胞)

适合大样本批量细胞分选,同步按比例放大抗体、磁珠使用量,体系体积控制在5~10mL,磁力静置5分钟,吸取细胞时枪头避开管壁磁性吸附区域。

分选缓冲液硬性要求

优先选用含1mM EDTA、2%胎牛血清的无菌PBS,或是FiniGet分必得®140-2001专用细胞分选缓冲液;缓冲液里不能添加钙离子、镁离子、游离生物素,这类物质会破坏磁珠与抗体结合,降低CD3分选纯度。

 

六、实验室高频问题与标准化解决方案
1. 样本红细胞污染严重,CD3分选纯度偏低

处理办法:执行FiniGet分必得®标准裂红操作流程,磁珠孵育完成后多增加一轮洗涤步骤,减少红细胞和磁珠的非特异性吸附。

2. 冻存复苏细胞成团,T细胞分选纯度波动较大

处理办法:参照试剂盒说明书,DNase I室温孵育15分钟,细胞筛过滤去除团块后,再走完整套FiniGet分必得®细胞分选流程。

3. 细胞分选后细胞活性偏低,无法开展细胞培养

处理办法:全程使用低吸附离心管、低吸附吸头,吹打、倾倒动作尽量轻柔,减少机械损伤;需要细胞培养的实验,全部分选操作在无菌操作台内完成。

 

七、试剂盒保存与使用注意事项

1. 整套FiniGet分必得®试剂全程2-8℃冷藏存放,切勿冷冻,有效期12个月;

2. 链霉亲和素磁珠使用前充分涡旋震荡30秒,禁止高速离心;

3. FiniGet分必得®这款细胞分选试剂盒仅用于科研场景,不能用于临床体外诊断;

4. 磁珠孵育过程中如果出现细胞沉淀,可以每2分钟轻弹管壁、轻柔吹打混匀。

八、总结

文中汇总了广东区域多所高校、三甲医院使用FiniGet分必得®120-6001做CD3分选的实测纯度数据,搭配全套可溯源流式实验结果图,能直观看到这款试剂盒在新鲜、冻存、高红细胞PBMC样本下稳定的T细胞分选效果,同时在多品牌平行对比中展现出复杂样本条件下的纯度优势。文章另附标准化细胞分选纯度评估方案与操作流程,华南地区做免疫课题的科研人员,可作为试剂盒选型、日常实验操作的可视化参考。

想查看同系列产品实测内容,可以浏览FiniGet分必得®人CD4、人CD8、人B细胞、人NK细胞分选汇总案例;想看更多细胞分选技术方案与实验案例,可访问细胞分选技术专题。

广州总部支持FiniGet分必得®细胞分选免费Demo实测,有CD3分选、T细胞分选相关实验需求的华南课题组,都可以联系技术支持咨询。

发布者:信天翁生物科技(广州)有限公司
联系电话:4000901923
E-mail:service@gooniebio.com

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