通用型组织解离液 - 单细胞样本制备标准Protocol

一、实验前准备-全套试剂耗材

组织样本处理全套试剂耗材实拍图：

 

配套产品清单：

• PBS缓冲液 abs961、abs962

• 70μm筛网 abs7232

• RPMI1640培养基 abs9484

• 红细胞裂解液 abs9101

• 细胞分离液 abs9102

• 组织解离液 abs9482（核心产品）

二、样本取材及预处理

 

操作说明：小鼠断颈处死后，根据实验需求进行取材，可分离取材部位包含：结肠、脾脏、肠道组织、肺组织等各类小鼠脏器。

三、标准化组织解离步骤参考
1、组织消化解离

1. 酶消化：将组织块（约100-200mg）转移至离心管，加入 1 mL 组织解离液abs9482（难消化组织可延长孵育时间）。

2. 摇床孵育：将离心管置于 37℃恒温水平摇床，以 80-100 rpm 的转速孵育 30-40分钟。【也可使用全自动组织处理器替代手动摇床】

3. 过滤过筛：70μm 细胞筛网（abs7232）过滤，预冷 1×PBS 3-5mL 冲洗筛网；
   注：过滤筛网时若残留明显组织块，可用5 mL注射器活塞研磨组织，直至无肉眼可见组织碎片。

4. 细胞悬液 4℃，400 g 离心5 min，弃去上清；

5. 细胞沉淀使用预冷1x PBS（abs962）重悬，4℃，400 g 离心5 min，弃去上清；

6. 可选步骤：根据实验需求，使用红细胞裂解液（abs9101）去除样本内红细胞干扰；

7. 适量预冷1x PBS重悬细胞沉淀，得到纯净单细胞悬液，可直接用于后续流式、细胞分选等实验。

2、细胞计数，活率测定

使用本解离液解离小鼠不同组织制备单细胞悬液后，可通过流式细胞仪检测细胞活率，不同脏器样本均能获得高活率单细胞。

3、流式结果展示

小鼠脾脏组织单细胞悬液流式染色结果

小鼠肺脏组织单细胞悬液流式染色结果

小鼠肝脏组织单细胞悬液流式染色结果

小鼠小肠组织单细胞悬液流式染色结果

小鼠肾脏组织单细胞悬液流式染色结果

小鼠心脏组织单细胞悬液流式染色结果

 

通用型组织解离液-abs9482 已发表部分文献

发表日期	杂志名称	影响因子	引用产品	组织
2026-03-02	Mater Today Bio	10.2000	abs9482	小鼠皮下注射部位组织（皮下结缔组织 / 局部软组织）
2023-04-17	ANALYTICA CHIMICA ACTA	6.9110	abs9482	小鼠脑组织（丘脑、大脑、小脑）
2024-12-01	Pharmacological Research	9.1000	abs9482	小鼠乳腺肿瘤组织
2025-12-03	Bioact Mater	20.3000	abs9482	小鼠下颌骨骨折痂组织
2024-04-30	J Nanobiotechnology	10.2000	abs9482	小鼠肿瘤组织（双侧肿瘤组织）
2024-10-02	European Journal of Pharmacology	4.2000	abs9482	小鼠肾脏组织
2025-01-24	Mol Cancer Ther	5.3000	abs9482	小鼠肿瘤组织（CT26、A375 移植瘤）
2025-07-12	J Mater Chem B	5.7000	abs9482	小鼠 4T1 乳腺肿瘤组织
2025-04-22	Pain	5.9000	abs9482	大鼠脊髓背角组织（SDH）
2024-05-01	中南大学		abs9482	小鼠肺组织
2025-02-03	Advanced Science	14.1000	abs9482	小鼠肺腺癌异种移植肿瘤组织（xenograft tumor tissues） 小鼠正常肺组织（mouse lung tissues）
2023-05-28	ADVANCED FUNCTIONAL MATERIALS	19.0000	abs9482	小鼠 4T1 乳腺肿瘤组织
2026-04-01	Korean J Pain	3.1	abs9482,abs9936	小鼠脾脏组织
2025-05-27	International Immunopharmacology	4.8000	abs9482	小鼠心脏组织、小鼠脾脏组织
2026-01-06	J Transl Med	7.5000	abs9482	小鼠膀胱组织
2026-02-10	Cell Death Dis	9.6000	abs9482	小鼠结肠组织
2026-03-07	MedComm (2020)	10.7000	abs9482	小鼠肝脏组织
2026-03-12	Neurotherapeutics	6.9	abs9475,abs9482	小鼠脊髓组织（脊髓损伤模型）
2025-04-30	Frontiers in Immunology	7.2000	abs9482	小鼠 MC38 结直肠癌皮下移植瘤组织
2026-01-04	Adv Sci (Weinh)	17.4750	abs9482	人乳腺癌组织、小鼠 4T1 乳腺肿瘤组织
2025-04-11	PLoS Pathog	5.5000	abs9482	小鼠肺组织（SARS-CoV-2 假病毒感染后的肺组织）
2023-02-19	Advanced Science	15.1000	abs9482	小鼠皮肤组织
2025-07-17	Advanced Science	14.1000	abs135524,abs9482	小鼠胰腺肿瘤组织（KPC 原位胰腺癌组织）

 
实验所用试剂耗材
 

货号-规格	名称	操作
abs7232-1箱	70um细胞筛网（200目，白色，底面过滤）
abs9101-100mL	红细胞裂解液（1×）
abs9102-100mL	细胞分离液
abs9475-500mL	细胞染色缓冲液
abs9482-10mL	组织解离液
abs9482-10mL×5	组织解离液
abs9484-500mL	RPMI 1640培养基（含L-谷氨酰胺，不含HEPES）
abs961-500mL	PBS缓冲液（10×）