影响慢病毒感染效率的因素

慢病毒既可以感染分裂细胞与非分裂细胞，还能将外源基因整合到宿主染色体上，从而实现长期稳定的表达，是体内和体外基因传递的有效工具。然而慢病毒感染效率受到多种因素的影响，今天就一起分析一下影响慢病毒感染效率的因素：

1. 病毒本身
首先，考虑病毒包装制备是否存在问题，比如外源基因是否正确，病毒滴度是否合格等。其次，考虑病毒运输和保存方式是否得当，解冻病毒一定要在冰上进行，尽量避免反复冻融，否则会影响病毒滴度；分装的病毒-4℃可以保存3天，-80℃保存半年以上需要重新测定滴度。

2. 细胞状态
细胞良好的生长状态是达到高感染效率的保证，一般选择细胞形态较好、轮廓清晰、处于对数生长期的细胞进行感染可提高感染效率。

3. MOI值
理论上MOI值越大，慢病毒感染上的可能性也越大，感染效率越高，但对细胞的毒性也越大（需要的MOI值越大，表明目的细胞越难被感染，慢病毒对细胞的毒性也越大）。所以实验中可以通过预实验确定合适的MOI值来达到相对较高的细胞存活率和病毒感染率。

4. 感染时间
慢病毒一般在感染后24h换液。感染后换液太早会导致感染效率下降;感染后换液太晚，则对细胞的损伤太大，效率也不高（如果慢病毒对细胞有明显毒性，可根据细胞生长状态在4-24h后换液）。由于慢病毒的表达较慢，荧光表达所需时间较长，可在感染72~96h后观察荧光的表达。