赛诺菲的in vivo CAR-T

本文来源于微信公众：Bloki 作者：Bloki

In vivo CAR-T赛道火热，各大药企纷纷关注，分享一个赛诺菲做的in vivo CAR-T，具体内容如下：

文章做的是CD8纳米抗体修饰的LNP递送靶向CD22的CAR mRNA：对离子化脂质、PEG脂质进行了筛选，通过点击化学在LNP表面安装CD8纳米抗体

筛选递送效率高的离子化脂质：LNP递送GFP mRNA，筛到了脂质15

筛递送效率高的PEG脂质：LNP递送GFP mRNA，筛到了DPG-PEG

筛靶向T细胞的抗体部分：Dil标记的LNP递送GFP mRNA（摄取、表达双角度），筛到纳米抗体Nb8（靶向CD3的SP34会刺激T细胞分泌IFNr）

纳米抗体Nb8修饰的LNP高效介导CD8 T细胞表达GFP

人源化纳米抗体，得到Nb8-H3，体外，Nb8-H3修饰的LNP除了介导CD8 T细胞表达GFP外，还会介导NKT和NK细胞表达GFP

体外，纳米抗体修饰的LNP特异性介导CD8 T细胞表达CAR

体外，LNP制备出的CAR-T杀B细胞（22-V4指示靶向CD22的CAR）

体外，LNP制备出的CAR-T特异性杀CD22+靶细胞（22-V4指示靶向CD22的CAR，m971指示靶向另一个靶向CD22的CAR，FMC63指示靶向CD19的CAR）

成像流式数据说明纳米抗体修饰的LNP体外介导CD8 T细胞表达CAR

成像流式数据说明纳米抗体修饰的LNP体外制备出的CAR-T识别结合靶细胞

纳米抗体修饰的LNP体外制备出的CAR-T持续杀靶细胞

纳米抗体修饰的LNP介导细胞因子分泌，暗示有一定免疫原性

mRNA如果不纯，其中的dsRNA会引起细胞因子分泌，纯化后改善 – 暗示mRNA生产工艺很关键

体外实验完成，开始体内实验：人源化小鼠体内，纳米抗体修饰的LNP特异性介导CD8 T细胞表达GFP

人源化小鼠体内，纳米抗体修饰的LNP特异性介导多部位CD8 T细胞表达靶向CD22的CAR

体内CAR可长时间表达

体内，纳米抗体修饰的LNP“干掉”脾脏B细胞

体内，纳米抗体修饰的LNP不影响小鼠体重、脾脏重量分数

体内，纳米抗体修饰的LNP抑瘤

体内，纳米抗体修饰的LNP干掉肝脏、脾脏B细胞

各大药企纷纷入局in vivo CAR-T，技术路线已经相对成熟（我们分享了很多in vivo CAR-T的文章，mix到一起就是很全面的技术路线），按部就班的去筛呗。