ELISA试剂盒特点与样本处理要求介绍

ELISA是酶联免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。

一、ELISA试剂盒特点：

1、特异性

ELISA试剂盒的特异性与试剂盒的要害组分，抗体对有关。若抗体对中为多抗，另一个有必要为单抗，建议运用双单抗。挑选一个好的ELISA试剂盒，咱们首先要考虑的就是特异性。

2、灵敏度

ELISA试剂盒的好坏往往就取决于灵明度的高低，因而灵敏度也是咱们挑选ELISA试剂盒的一个重要技术参数。灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的量的才能，用户可根据自己样本中待检目标的量挑选合适的试剂盒，假如待检目标量很低，一般的试剂盒不能满足要求，可挑选高敏的ELISA试剂盒。

3、重复性

科学实验讲究重复性，一般 ELISA试剂盒，其板内和板间变异系数应该控制在 15% 以内。
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二、样本要求:

1．样本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

三、样本处理及要求：

1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。