应用案例：中药材蟾酥的分析与鉴定

蟾酥(Bufonis Venenum)，作为中国传统的中药材之一，已有一千多年的沿用历史。据《中华人民共和国药典》2020年版一部的收载^[1]，蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍(Bufo bufogargarizans Cantor)或黑眶蟾蜍(Bufo melanosticus Schneider)的干燥分泌物。在现代药理研究中，蟾酥具有抗肿瘤、强心、抗菌、抗炎、镇痛等药理作用。而含有蟾酥成分的成药制品如麝香保心丸、六神丸等已上市且被用于临床治疗中^[2]。

蟾酥对照药材中，成分复杂，且目标峰附近存在较多不易分离的杂质，目前许多品牌色谱柱均无法解决该问题，导致检测结果与药典要求相差甚远。

*2020版《中国药典》中规定供试品特征图谱中应呈现5个特征峰，并应与对照药材参照物色谱峰中的5个特征峰相对应，其中峰4应与华蟾酥毒基参照物峰的保留时间相一致。

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A，0.3%乙酸溶液为流动相E，按 下表中的规定进行梯度洗脱;柱温为30°C;流速为每分钟 0.6ml;检测波长为296nm。理论板数按华蟾酥毒基峰计算应不低于10000。

 

本文依据2020版《中国药典》通则0521的高效液相色谱法，对蟾酥进行了测定。

✦+色谱条件

样品名称：蟾酥

色谱柱： MicroPulite^® XP tC18 5µm 4.6*250mm

流动相：CH3CN:0.3%乙酸梯度洗脱

时间（分钟）	0.3乙酸（%）	乙腈（%）
0	72	28
15	46	54
35	46	54
35.1	72	28
45	72	28

流速：0.6ml/min

柱温：30°C

检测波长：296nm

进样量：10µl

结论：通过以上实验结果可以看出，MicroPulite^® XP tC18（ 5µm 4.6*250mm）液相检测图谱符合药典要求，且峰形优异。

 

参考资料：
1.StatePharmacopoeiaCommission.Pharmacopoeiaofthepeople'srepublicofChina:volumeI[M].
Beijing:ChinaMedicalSciencePress，2020:401-402.
2.DOI: 10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2021.0183