免疫组化假阴性和假阳性结果的原因:
1、假阴性结果的原因主要是:
(1)抗体已失活或浓度不当或抗体本身达不到应有的敏感度;
(2)由于组织自溶,抗原扩散而导致抗原消失,特别在长期固定的标本中因抗原漏出而致假阴性,因此应多用新鲜固定之标本;
(3)操作步骤不当,如反应时间不够或过久、洗脱不够或温度过高;
(4)组织或细胞中抗原的含量很低,所用的方法难以检测到,如用直接法检测为阴性,但改用间接法时则为阳性。
2、假阳性结果的主要原因是:
(1)所用的抗体与其它无关的抗原有交叉反应,特异性差,特别在应用多克隆抗血清时更易出现;
(2)所用抗体浓度过高或染色过程中切片干燥导致抗体与组织产生非特异性结合;
(3)组织或细胞中有内源性过氧化物酶、碱性磷酸酶及生物素等产生非特异性显色;