HNB变色染料使用说明

HNB变色染料使用说明​​
HNB变色染料
Cat. No.: A3822    Size: 500T
 
产品描述：
羟基茶酚蓝（HNB)指示染料，可与Mg2+形成复合物，为紫罗兰色。在 LAMP反应中由于大量焦磷酸盐的形成，焦磷酸盐将螯合掉Ma2+。使得HNB的颜色变为天蓝色，因此该试剂可作为LAMP反应的指示染料，阳性扩增样品为天蓝色，而阴性仍然保持紫罗兰色。HNB变色染料可与UDG LAMP防污染扩增试剂盒搭配使用从而建立可视化检测方法。
 
HNB变色染料使用说明​​方法:
1.该制品为冻干品形式，首次使用前使用0.2ml ddH₂O溶解后使用，溶解后使用为50×浓度。溶解前可保存于室温，溶解后制品要保存在-20℃以下。
2.参考UDG LAMP防污染扩增试剂盒配制反应体系在0.2ml EP反应管中加入下述试剂：
10xIsothermo Buffer（Mg2+ free）        2μl   
Bst6.0 DNA/RNA Polymerase(8U/μl)     0.5~1μl  
10mM dUTP Mixture                      1.6μl  
溶解后的HNB染料（50x）                0.4μl  
100mM Mg2+                            1.2μl  
LAMP Primer Mix                         1-2μl  
模板DNA or RNA                           1μl  
ddH₂O到总体积                          20μl  
 
3. 反应体系配好后，置于60~65℃（首次实验采用60℃）进行反应30~60min。
 
存储：RT
 
注意事项：
HNB搭配的最佳Mg2+浓度为6mM，即20μl 反应体系中加入1.2μl 的Mg2+（10mM）。
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