科普抗体标记常见种类

标记抗体是免疫电镜样品制备的一种常见方法，该技术由于操作简单、灵敏度高，常应用于IHC，WB，ICC，ELISA等实验。通过标记物的增强放大效应来定位分析抗原，是目前市面上理想的快速价廉的定量检测方法。抗体标记主要有酶标记、荧光素标记、同位素标记、生物素标记等，还有一些其他的标记方法例如胶体金标记，下面具体来展示抗体标记种类：

1、辣根过氧化物酶（HRP）标记，HRP标记单抗和多抗的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基被氧化成醛基，随后与抗体蛋白的氨基结合，形成Schiff碱。常用的HRP的底物有邻苯二胺（OPD）、四甲基联苯胺（TMB）和ABTS等，其中TMB是最常用于 WB、ELISA等实验的底物显色试剂，经HRP作用后由无色变蓝色，目测对比鲜明；加酸停止酶反应后变黄色，可在比色计中定量。云克隆公司ELISA试剂盒中的检测试剂B即为HRP标记的抗体，再与TMB显色底物反应用于定量检测。

2、异硫氰酸荧光素（FITC）标记，FITC是最常用的荧光素，其原理是在碱性条件下，FITC 的异硫氰基能与IgG的自由氨基结合，形成IgG与荧光素的结合物，该荧光被捕捉后即可被检测到，目前市面上这种标记抗体大多被选择作为荧光二抗，可用于免疫组织化学单染或多重染色。通过荧光显微镜或者流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位、定量的检测。
          
3、生物素（Biotin）标记，现在应用广泛的是生物素-亲合素系统，生物素与亲和素之间高亲和力的牢固结合以及级联放大效应，标记蛋白质这类大分子，再通过显色系统可以定量或者半定量地进行抗原分析。

4、胶体金标记（GICT），蛋白质可与胶体金颗粒通过静电结合从而被吸附到其表面，由于胶体金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒。由于检测结果直接可以用颜色显示，肉眼判断容易，无需仪器设备，特别适合广大基层单位、医院、野外作业者以及偏远地区等应用。该标记技术已纳入公司的研发项目，广大的科研工作者很快就能获得此类的标记抗体。

5、化学发光标记，使用化学发光剂直接标记抗体，常用的标记发光剂是鲁米诺类，采用增强型的ECL发光体系作为发光底物试剂来实现标记检测，云克隆公司的化学发光试剂盒即采用这一标记技术，用于定量检测相关蛋白等物质。