柱后衍生系统在河豚毒素检测的新应用
去年游族创始人遭人投毒致死，英年早逝令人惋惜。据某些报道称其中的毒之一就是河豚毒素。像这样的河豚毒素中毒事件在日常生活中也有发生。近日，广东省卫健委通报的广东三起较大级别的食物中毒事件中，其中两起为河豚毒素中毒，且中毒两人均死亡。
什么是河豚毒素呢
河豚毒素（tetrodotoxin，TTX），分子式为C11H17O8N3，是鲀鱼类（俗称河豚鱼）及其它生物体内含有的一种生物碱。河豚毒素为氨基全氢喹唑啉型化合物，是自然界中所发现的毒性最大的神经毒素之一，曾一度被认为是自然界中毒性最强的非蛋白类毒素。这种毒素主要作用于肠道，被肠道吸收后便会迅速作用于神经末梢和神经中枢，可高选择性和高亲和性地阻断神经兴奋膜上钠离子通道，阻碍神经传导，从而引起神经麻痹而致死亡。
河豚体内的毒性在各个部位不同，甚者季节也会影响河豚体内的毒性。据研究显示，河豚在生殖季节毒性大，且雌性大于雄性，而在不同部位中，卵巢>脾脏>肝脏>血液>眼睛>鳃耙>皮肤>精巢。一般情况下，河豚的肌肉中是不含有毒素的，但河豚死后内脏中的毒素可少量地渗入肌肉中。
方法介绍
目前食品中河豚毒素的检测主要依据GB 5009.206-2016，包括小鼠生物法、液相色谱-串联质谱法、液相色谱-荧光检测法和酶联免疫吸附法。其中小鼠生物法虽为世界普遍的参考方法，但存在小鼠个体差别大导致结果异常的现象；液相色谱-串联质谱法仪器成本高，对操作人员水平要求严格；酶联免疫吸附法属于半定量方法且商品化试剂盒较少；故采用液相色谱-荧光检测法。为保证检测结果更加精准可靠，普瑞邦特对该方法进行优化，采用诺尔液相搭配Pribolab®MDS多功能光电衍生系统进行河豚毒素的检测。经液相色谱分离后，河豚毒素在Pribolab®MDS多功能光电衍生系统内与高温的氢氧化钠溶液反应，生成具有强荧光效应的C9碱，荧光检测定量限为300ppb，满足国标要求。
实验条件
-
色谱柱: C 18 柱,柱长 150mm ,内径 4. 6mm ,粒径 5 μ m ,或等效柱。
-
流动相:乙腈 - 乙酸铵缓冲液( 5+95 ,体积比)。
-
流速: 1. 0mL / min 。
-
柱温: 30℃ 。
-
检测波长:激发波长 385nm ,发射波长 505nm
注：如需优化后的方法，请与我们联系
谱图
上图为1ppm河豚毒素柱后衍生产物荧光谱图
耗材加油站
|
产品编号/货号 |
名称 |
型号/规格 |
|
PR-185150 |
C18色谱柱 |
15cm*4.6mm*5um |
|
IAC-M10-3 |
河豚毒素免疫亲和柱 |
25/50T |
|
STD#M009 |
河豚毒素标准品 |
20ug/mL |
|
EQ-EVP 3024 |
Pribolab®真菌毒素浓缩器 |
EQ-EVP24 |
|
EQ-MDS2010/2020 |
Pribolab®MDS多功能光电衍生系统 |
MDS-3000/3100 |
|
MSS3009 |
Pribolab®河豚毒素 |
1mg |
