高灵敏度DNA和RNA定量试剂测定与UV吸收率测定方法的效果对比

DNA编码所有遗传信息，是创造所有生物生命的蓝图。它充当遗传物质在世代之间传递的存储设备，RNA充当DNA中存储的蓝图的读取器。储存在DNA中的遗传信息由RNA携带，在核糖体形成蛋白质的过程中充当信使。这整个过程称为分子生物学的“中心教条”。由于核酸分析的范围继续扩大，在核酸检测方法的选择上也是五花八门。影响检测方法选择的关键因素包括稳定性、灵敏度、速度和方便性，以及检测试剂和检测系统的总成本。核酸超灵敏分析的原因包括单细胞和稀有细胞的遗传物质分析，如母体循环中的滋养细胞，以及单拷贝基因检测。此外，更好的检测方法可以提供一种需要较少扩增周期的分析途径，或者消除核酸扩增反应的多周期方案（例如，PCR）。尽管许多检测技术，如基于化学发光的检测技术，在未来可能会发挥重要作用，但目前荧光技术仍然是核酸分析中应用最广泛的检测技术。

DNA和RNA定量试剂

Helixyte 绿色dsDNA定量试剂（Cat#17597）和StrandBrite 绿色RNA定量试剂（Cat#17611）分别对双链DNA和单链RNA进行了优化。它们对核酸有很高的亲和力，对结合核酸有极大的荧光增强作用，使得在几分钟内直接检测复杂溶液中微量核酸成为可能，而且一般不会受到其他生物分子的干扰。

图1.小牛胸腺DNA中使用Helixyte 绿色和PicoGreen进行DNA定量。由图看出Helixyte 绿色和PicoGreen  具有几乎相同的性能。

Helixyte Green是一种出色的核酸定量试剂，与dsDNA结合后可显著增强荧光。它具有与PicoGreen®相同的光谱特性，因此是PicoGreen®的绝佳替代品（PicoGreen®是Invitrogen的商标）。它是可用于定量溶液中DNA的最敏感的染色剂之一。使用Helixyte Green，您可以在ssDNA，RNA和游离核苷酸存在的情况下选择性地检测低至25 pg / ml的dsDNA。该测定法在三个数量级上是线性的，并且几乎没有序列依赖性，使您能够准确地测量来自多种来源的DNA，包括基因组DNA，病毒DNA，微量制备DNA或PCR扩增产物。

在进行Northern杂交分析、S1核酸酶分析、RNase保护分析、cDNA文库制备、反转录PCR之前，检测和定量少量RNA对于多种分子生物学过程非常重要，例如测量体外转录RNA的产量和测量RNA浓度。测量核酸浓度最常用的技术是在260nm处测定吸光度，吸光度法的主要缺点是蛋白质、游离核苷酸和其他紫外线吸收化合物的干扰，但使用敏感的荧光核酸试剂可以缓解这种干扰问题。StrandBrite RNA定量试剂是一种用于溶液中RNA定量的超灵敏荧光核酸染料。StrandBrite RNA定量试剂可以用荧光酶标仪或荧光分析仪检测到低至5ng/mL的RNA。

Helixyte 绿色 dsDNA和StrandBrite 绿色 RNA定量试剂的优势：

• 高灵敏度：Helixyte 绿色和StrandBrite 绿色的灵敏度比UV吸收率测定法高10,000倍。
• 选择性高：与紫外吸收的测量不同，这些检测不受蛋白质，游离核苷酸或非常短的寡核苷酸的影响，从而使完整的寡核苷酸和核酸的定量在复杂混合物（例如血清或全血）中更加准确。
• 操作简单：这些检测方法非常简单，不需要分离步骤，因此非常适合自动化，高通量筛选。
• 检测范围广：对于Helixyte 绿色的检测，定量在四个数量级内都是准确的。基于StrandBrite 的荧光检测在三个数量级上都是准确的。

相关产品推荐

表1.dsDNA定量相关产品

表2.RNA定量相关产品

百萤生物是美国AAT Bioquest中国区域代理商，为您提供AAT Bioquest最优质的产品、最详尽的技术和最前沿的资讯，欢迎来电咨询！

• 订购电话：029-68064558
• 邮箱：xiaodong@tjbiolite.com;info@tjbiolite.com