β‑琼胶酶因的制备方法步骤
浏览次数:325 发布日期:2020-3-24
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1.一种β-琼胶酶,其氨基酸序列如序列表中SEQIDNO:1所示。2.一种β-琼胶酶基因,编码权利要求1所述的β-琼胶酶,其核苷酸序列如序列表中SEQIDNO:2所示。3.权利要求2所述β-琼胶酶基因的制备方法,包括以下步骤:以柠檬假交替单胞菌PseudoalteromonascitreaYTW1-15-1的基因组DNA为模板,在上游引物、下游引物的作用下进行PCR反应;PCR反应结束后,对PCR产物进行电泳,切胶回收产物,即得到所述的β-琼胶酶基因。4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:所述的上游引物为5’-CGCGGATCCGCAGATTGGGACGCATATAG-3’,所述的下游引物为5’-CCGCTCGAGTTAGTTTGCTTTGTAAACACG-3’。5.一种β-琼胶酶基因重组载体,由权利要求2所述的β-琼胶酶基因与表达载体pET28a(+)构建而成。6.权利要求5所述β-琼胶酶基因重组载体的制备方法,包括以下步骤:1)取权利要求2所述的β-琼胶酶基因与pMD19T载体连接,构建β-琼胶酶基因克隆载...
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一种β‑琼胶酶,其氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。
一种β‑琼胶酶及其编码基因和应用,所述β‑琼胶酶的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,所述β‑琼胶酶的编码基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。本发明专利技术所述的β‑琼胶酶,具有良好的热稳定性和酶活性,能够特异性降解琼脂糖,产生单一的终产物新琼四糖,为琼胶寡糖的制备提供了新的酶源。