红细胞裂解液操作方法

红细胞裂解液(RBL Buffer)是一种从组织或血液中分离淋巴细胞、单核细胞或其它种类的细胞，特异地裂解红细胞，以去除由于红细胞混杂所造成的干扰的裂解液。通过其优化配方，此裂解液可在单细胞悬液中（如小鼠脾脏单细胞悬液和人末梢血样品）大程度的裂解红细胞，同时最小程度的影响其它种类的细胞。本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，如鸟或禽类的红细胞。
红细胞裂解液操作方法

 

1. 该制品浓度为1×，可直接使用。

2. 向1倍体积抗凝全血中加入5倍体积的RBL Buffer，混合均匀，室温放置10min使红细胞充分裂解为透明状。例如：向1 ml抗凝全血中加入5ml RBL Buffer充分混合均匀。 

3. 3000rpm室温离心10min，弃上清，留取底部细胞团块。

4. 重新加入5倍体积的RBL Buffer重悬底部细胞团块，用移液器反复吹吸混合均匀，室温放置10min。

5. 3000rpm室温离心10min，弃上清，留取底部细胞团块。如仍然存在明显的红细胞，则重复步骤4直至没有红细胞为止。