制备抗体酶结合物的方法通常有以下几种

 酶标记的抗原或抗体称为结合物（conjugate）。抗原由于化学结构不同，可用不同的方法与酶结合，如为蛋白质抗原，基本上可参考抗体酶标记的方法。制备抗体酶结合物的方法通常有以下几种。

 1.戊二醛交联法：戊二醛是一种双功能团试剂，可以使酶与蛋白质或其他抗原的氨基通过它而偶联。戊二醛交联可用一步法（如连接AP），也可用二步法（如连接HRP）。戊二醛一步法操作简便、有效，而且重复性好。缺点是交联时分子间的比例不严格，大小也不一，影响效果。制备HRP抗体结合物也可用二步法，即先将HRP与戊二醛作用，透析除去戊二醛，在pH9.5缓冲液中再与抗体作用而形成酶标抗体。此法的效率可高于一步法l0倍左右。

 2.过dian酸盐氧化法：本法只用于HRP的交联。该酶含18%碳水化合物，过dian酸盐将其分子表面的多糖氧化为醛基。用***钠（NaBH4）中和多余的过dian酸。酶上的醛根很活泼，可与蛋白质结合，形成an摩尔比例结合的酶标结合物。有人认为此法为辣根过氧化物酶交联zui有效的方法。但也有只认为由于所用试剂较为剧烈，各批实验结果不易重复。