液相色谱柱正确使用方法

一、样品方面

1.除去微粒及杂质

2.了解样品在流动相中的溶解度

如溶样品的溶剂不是流动相，一定要用流动相试溶解度，防止其在流动相中析出

3.了解样品与色谱柱的基质/填料是否有相互作用

二、流动相方面

1.除去微粒

纯度的要求：超纯水，梯度实验时水中有机杂质含量要低；缓冲液的PH值，在填料的允许范围内；缓冲液（盐）的浓度；有机溶剂：色谱纯，杂质含量尽量低，并与填料相匹配

2.流动相对样品的溶解度

有机溶剂或水的比例

三、色谱柱的清洗

对所做的样品要有充分的了解，用对该样品洗脱能力最强的流动相清洗

硅胶柱的一般方法是先用甲醇洗去极性杂质，然后用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化

键合相柱（烷基）的一般方法是用20倍体积的甲醇-氯仿-甲醇-水依次冲洗

（记住：每种色谱柱可能性有特定的方法，一定要先看其使用说明！）

四、色谱柱的存放

存放前的处理要除去杂质、缓冲盐

合适的存放溶剂

避免色谱柱床的干涸

避免机械震动

防止细菌生长

注意存放的温度