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黄曲霉毒素分析方法汇总

浏览次数:4715 发布日期:2012-1-10  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
黄曲霉毒素分析方法汇总
 
一、多功能净化柱+KRC光化学柱后衍生法
1 简介
多功能净化柱是由多种固相复合填料不仅包括大分子物质,更重要的是含有多种活性亲脂性(非极性)和带电(极性)物质,用来吸附各种酯类,叶黄素,化学物质,碳水化合物和蛋白质等干扰物。多功能净化柱+KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast 226/260多功能净化柱可以将黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2很好的分离出来,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系统可以有效的测定黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2含量。
2 多功能净化柱特点:
2.1 多功能净化柱可以简化样品提取、净化步骤,无需清洗和洗提。
2.2 可以实现多种毒素检测,有效降低检测成本;
2.3 HPLC+FLD+KRC衍生化,可以有效提高检测灵敏度,实现较低的检测限(黄曲霉毒素B1 0.05ppb);
2.4 光化学衍生操作简便,无需使用衍生试剂(通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂,分析成本高,操作麻烦,仪器故障率较高);
2.5 一步法净化,回收率高达90%左右。
2.6 广泛适用于各类农产品:谷物、淀粉、动物饲料、食品、坚果、棉籽等。
3 多功能净化柱/KRC衍生法操作步骤简介:
3.1 提取样品:研磨粉碎、称重25g样品;用乙腈/水(84/16 V/V)混合样品,
高速均质 1 分钟。
3.2 过滤:将提取的样品定量滤纸过滤,收集滤液;
3.3 取4-6ml滤液快速通过 多功能净化柱PribofastM226 或Pribofast M260
3.4 收集过柱溶液,直接用于HPLC检测,KRC衍生化后直接记录黄曲霉毒素浓度。
 
二、免疫亲和柱+KRC光化学柱后衍生法
1 简介
Pribofast黄曲霉毒素总量免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的毒素,从而对毒素样品起到非常针对性的纯化作用,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系统可以有效的测定黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2浓度,提高检测的准确性和灵敏度。
2 免疫亲和柱/KRC衍生法特点:
2.1 特异性很强使得样品净化效果极佳;
2.2 使用免疫亲和柱操作架可以使样品净化快速,提高检测效率高
2.3 HPLC+FLD+KRC柱后衍生化,有效提高检测灵敏度,实现较低的检测限 (黄曲霉毒素B1 0.05ppb)。
2.4 衍生化操作方便,光化学衍生化无需使用衍生试剂(通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂,分析成本高,操作麻烦,仪器故障率较高)。
2.5 回收率高,达到90%以上
3 免疫亲和柱法操作步骤简介:
3.1 提取样品:研磨、称重50g样品;用甲醇/水(80/20 V/V)混合物将样品
高速混匀 1 分钟。
3.2 过滤:将提取的样品滤膜过 玻璃纤维滤纸,
3.3 将回温的免疫亲和柱安装在泵流操作架进行过柱净化:经过Pribofast黄曲霉毒素总量免疫亲和柱(IAC-010-3)活化、淋洗、洗脱三步骤,洗脱下来的溶液可直接用于HPLC检测;
3.4 测定:HPLC直接进样,经色谱柱、KRC光化学柱后衍生化后直接记录黄曲霉毒素浓度;
三、酶联免疫法检测黄曲霉毒素总量
1 采取直接竞争ELISA方法,利用酶标仪测定样品和标准品的样本的吸光值计算得到样品中黄曲霉毒素总量的含量。
2 试剂盒检测时间:15分钟+15分钟
3 检测限:0.1ppb
4 交叉反应率:
Aflatoxin B1
100%
Aflatoxin B2
80%
Aflatoxin G1
101%
Aflatoxin G2
100%
AflatoxinM1
25%
 
关于Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC参数
●Pribofast KRC 柱后光化学衍生器 波长:254 nm
●HPLC-色谱柱: 黄曲霉毒素专用色谱柱150 x 4.6 mm; C-18
●流动相: 甲醇/水  (45/ 55  v / v)
●流量:1.0 mL/min   柱温: 30 °C
●进样体积:20μL
●荧光检测器:λ-激发波长:365 nm    λ-发射波长:440 nm
●高效液相色谱仪需要配制:PriboLab公司Pribofast  KRC 柱后光化学衍生器,含有1ml反应池,纳米灯管254nm
 
关于黄曲霉毒素专用色谱柱:
产品货号
产品名称及规格
数量
IAC-010-3
Pribofast, Aflatoxins B1, B2, G1, G2  25 columns/pck 3mL, widebore column
黄曲霉素总量免疫亲和柱3ml,25支/盒
1盒
M226
PriboFast®226  Multifunctional cleanup column for Aflatoxin and zearalenone
霉菌毒素多功能净化柱,用于黄曲霉毒素玉米赤霉烯酮检测25支/盒
1盒
PriboFast® 260
PriboFast® 260 Multifunctional cleanup column for Aflatoxin and zearalenone
霉菌毒素多功能净化柱,用于黄曲霉毒素玉米赤霉烯酮检测25支/盒
1盒
PR K010-96
Pribofast ELISA Kit (96-well plate/stripes)  for detection of Aflatoxin B1, B2, G1, G2 in food and feed samples
黄曲霉素 总量ELISA试剂盒包,96孔
1盒
STD#1081
Standard, Solution of 4 different aflatoxins in acetonitrile B1, G1
黄曲霉素B1B2G1G2 混合标样。1ml装,4度阴暗保存
也可提供黄曲霉毒素B1B2G1G2 四种单独的固体装标准品。
1盒
KRC-25
Photochemical Reactor for Enhanced Detection Aflatoxin B1, B2, G1, G2; Pribofast KRC-25  230V 50 HzUVE 254 nm lamp
Pribofast KRC 光化学柱后衍生反应系统,254nm纳米紫外灯
1套
ODS-150
HPLC-Column for Aflatoxin Analysis, C18 150 x 4.6 mm  黄曲霉毒素专用液相色谱柱
1根
 
泵流操作架/免疫亲和柱操作架,用于免疫亲和柱样品净化操作
(含气泵 转换头等配件,多用连接头是选配)
1套
 
更多信息请点击:www.rapid-bio.com.com
 
关于PriboLab & 北京泰乐祺科技有限公司  
作为面向全球提供霉菌毒素检测技术解决方案的主要服务商之一,PriboLab凭借强大的研发团队和霉菌毒素检测技术的研究,为全球农业生产、食品加工与粮食、饲料工业等行业提供专业的真菌毒素检测技术产品与技术服务。北京泰乐祺科技作为 PriboLab在中国的唯一合作伙伴,积极为国内客户提供优质的霉菌毒素检测技术与产品服务,为国内客户提供适宜的霉菌毒素检测方案,帮助客户建立高效优质的霉菌毒素项目检测分析平台。
发布者:青岛普瑞邦生物工程有限公司
联系电话:17657127618
E-mail:info@pribolab.cn

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beijing (114.252.139.38)
北京泰乐祺科技有限公司专业提供致病菌、生物毒素、转基因以及药物残留等检测技术与产品服务,是国内最专业的真菌毒素检测产品和分析服务的公司,不仅提供全系列的真菌毒素液体和固体标准品,前处理用的净化柱和免疫亲和柱、试剂盒等,而且提供快速准确的分析检测业务。 分析检测的霉菌毒素种类: ■黄曲霉毒素类:黄曲霉毒素B1,黄曲霉毒素B2,黄曲霉毒素G1,黄曲霉毒素G2,黄曲霉毒素M1,黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2总量 ■ A/B型单端孢霉烯族化合物: T-2毒素,HT-2毒素,蛇形毒素(Diacetoxyscirpenol) ,二醋酸麃草镰刀菌烯醇(Neosolaniol),呕吐毒素(DON),3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3 Acetyl DON),5-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15 Acetyl DON),雪腐镰刀菌烯醇(Nivalenol),镰刀菌烯酮-X(Fusarenon-X) ■ 伏马毒素类:伏马毒素B1(fumonisin B1),伏马毒素B2(fumonisin B2) ■ 玉米赤霉烯酮(zearalenone),赭曲霉毒素A(ochratoxin A) ■ 桔青霉素(Citrinin),展青霉素(patulin) 采用技术手段: 高效液相色谱法、薄层层析TLC法、酶联免疫法 提供霉菌毒素检测服务的样品种类: ■ 原粮类(如谷物、玉米、大豆等) ■ 饲料及原料类(如豆粕、玉米、宠物食品) ■ 食品原料(包括淀粉 大米蛋白 玉米蛋白 谷朊粉 粮油 面粉 大豆制品等) ■ 粮食及其加工品 食品、饲料成分分析: 可为酿酒、果汁、食品和饲料工业提供有机酸、糖类醇类物质检测服务。 ■ 有机酸定量分析:包括苹果酸、柠檬酸、乙酸、乳酸、丙酮酸等。 ■ 糖和醇类定量分析:主要有乳糖、D-半乳糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉、乙醇、甘露醇、甘油等。 ■ 其他物质分析:氨、尿素、酮体、肉碱、膳食纤维、亚硫酸盐、二氧化硫、重金属铁铜。 提供真菌毒素的检测培训: 培训内容包括:高效液相色谱法、酶联免疫法、薄层层析TLC法。 培训费用:仅收取耗材费用(学员可以自带2个样品)。 公司网址: www.rapid-bio.com 公司邮箱: rapidtest@163.com 联 系 人:刘红兵 联系电话:010-633380700 13311089404
2012-3-29 11:40:00
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