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PLA可视化蛋白互作服务(24孔板)
该产品采用邻近连接分析技术,依靠 DNA 滚环扩增放大信号,单分子级原位可视化蛋白相互作用,有效区分单纯共定位与真实结合,适配细胞、组织样本,助力蛋白互作与信号通路科研。
服务类别:分子与细胞总访问:96
最后更新:2026-9-20半年访问:96
参考报价:1,500.00 /样
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服务商: 上海乐备实生物技术有限公司 查看该公司所有服务 >>
  • 服务介绍
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产品描述

本产品为LabEx提供的基于邻近连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA)技术的可视化蛋白互作检测服务,规格为24孔板。PLA技术是一种高灵敏度、高特异性的蛋白相互作用检测方法,能够在原位(细胞或组织样本中)对单个蛋白复合物进行可视化和定量分析。

该服务利用一对特异性抗体分别识别目标蛋白或同一蛋白复合物中的不同表位,当两个靶蛋白发生相互作用且距离足够近时(小于40 nm),抗体偶联的寡核苷酸探针通过连接酶反应形成可扩增的DNA环,随后通过滚环扩增产生信号,最终通过荧光标记探针杂交产生离散的点状荧光信号。每个荧光亮点代表一对相互作用的蛋白分子,实现了单个蛋白复合物的可视化检测。本服务仅限研究用途,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗。


产品规格

  • 服务形式:PLA可视化蛋白互作检测服务

  • 规格:24孔板

  • 检测原理:基于抗体偶联寡核苷酸探针的邻近连接及滚环扩增信号放大

  • 输出形式:离散点状荧光信号(每点代表一对相互作用蛋白分子)


应用建议

本检测服务适用于蛋白质相互作用研究,常见应用场景包括但不限于:

  • 蛋白-蛋白相互作用验证:在细胞或组织原位验证已知或新发现的蛋白复合物形成。

  • 蛋白质修饰与构象变化研究:检测蛋白质在特定刺激下的翻译后修饰、构象变化或复合物重排。

  • 信号转导通路研究:分析信号通路中关键蛋白复合物的动态组装与解离。

  • 亚细胞定位与共定位分析:结合荧光显微镜,研究蛋白复合物在特定细胞器或微区的分布。

  • 生物标志物与药物靶点研究:在病理组织中鉴定和定量疾病相关的蛋白复合物。


背景信息

邻近连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA)是一种基于抗体识别和DNA连接反应的创新蛋白互作检测技术。其核心原理是利用一对特异性抗体,各偶联一条独特的寡核苷酸探针。当两种目标蛋白(或同一蛋白上的两个表位)在空间上距离足够近(通常小于40 nm)时,两个探针通过DNA连接酶的作用连接形成闭环DNA模板。

随后,加入的聚合酶以该环状DNA为模板启动滚环扩增,产生长的DNA串联重复序列。加入的荧光标记寡核苷酸探针与扩增产物杂交,在目标蛋白互作发生的位置形成可检测的离散点状荧光信号。每个荧光亮点代表一个蛋白互作事件的检测,实现了单个蛋白复合物的原位可视化和绝对计数。

PLA技术将免疫学的高特异性与分子生物学的高灵敏度相结合,与传统蛋白互作检测方法(如Co-IP、FRET)相比,具有以下优势:能够在原生细胞或组织环境中检测蛋白互作,无需裂解细胞;灵敏度极高,可检测低丰度或瞬时的蛋白互作;提供单分子级别的空间分辨率;可进行定量分析。该技术已广泛应用于细胞信号转导、病毒-宿主相互作用、神经生物学及肿瘤微环境等领域的研究。


保存条件

  • 本产品为定制化检测服务,非实体试剂,因此不适用常规保存条件。

  • 客户样本的采集、运输与保存需严格遵循服务提供方的指导说明。通常建议将样本(如细胞爬片、组织切片)按照规范方法固定后,置于适当的保存液或干燥条件下,于2-8°C或-20°C避光保存和运输。

  • 具体的样本要求(如细胞类型、固定方法、保存介质等)请提前与LabEx技术支持团队沟通确认。


技术平台介绍

邻近连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA):一种基于抗体特异性识别靶蛋白、通过抗体偶联寡核苷酸链引导连接反应实现信号放大的蛋白互作检测技术。其核心原理是当两个靶蛋白发生相互作用且距离足够近时,抗体偶联的寡核苷酸可通过连接酶形成可扩增的 DNA 片段,最终通过荧光标记探针杂交产生离散点状荧光信号(每个亮点代表一对相互作用的蛋白分子)。

 

可视化蛋白互作(PLA)实验流程

抗体-A+抗体-B结合目标蛋白 → DNA探针靠近 → 连接 → 扩增 → 信号检测
1) 封闭样本
2) 一抗孵育: 两种一抗分别与位于一种蛋白质或两种邻近蛋白质上的目标表位结合
3) Navenibody孵育: Navenibodies(与专有寡核苷酸臂结合的精选抗体)与各自的一抗结合
4) DNA circle形成: 当 Navenibodies 靠近时 , 附着的寡聚物能形成 DNA circle ,通过减少非特异性背景染色来保证高特异性5) 扩增和检测 :加入聚合酶后 , 就会启动    滚环循环扩增过程。 标记的探针与扩增的      DNA结合 , 显色形成亮点

详情点击→ https://www.u-labex.com/detail-lxplac24-1.html?mk_channel=SWQC
 
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