基于液相色谱-串联质谱的靶向蛋白质组学分析方法

在生物药生产过程中，宿主细胞蛋白（HCP）残留是影响药物稳定性的关键因素之一。其中，脂肪酶类HCP由于可能降解制剂中常用的表面活性剂（如吐温-80/20）成为HCP残留中的重点关注对象。吐温降解会导致药物溶液中游离脂肪酸增多，可能引起蛋白聚集、形成脂肪酸-蛋白复合物颗粒，进而影响产品的安全性与有效性。

ELISA HCP检测方法虽能评估总体HCP水平，但无法识别具体种类的脂肪酶，难以对工艺相关风险进行精准评估。为解决这一问题，Cygnus Technologies开发了基于液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）的靶向蛋白质组学分析方法（CHO 6xLipase™ MS Assay）。该方法采用平行反应监测（PRM）技术和稳定同位素标记肽段（SIL），实现对可以引起吐温降解的六种CHO来源
HCP脂肪酶的绝对定量：
 

HCP 蛋白	LOD (ppm)	定量范围(ppm)
溶酶体酸性脂肪酶（LAL）	0.15	18.25 - 292.06
脂蛋白脂肪酶（LPL）	0.08	0.10 - 323.34
磷脂酶A1（PLA1）	0.12	0.49 - 311.67
XV组溶酶体磷脂酶A2（GXVPA2）	0.03	4.72 - 302.31
磷脂酶B样蛋白2（PLBL2）	0.56	0.66 - 419.46
磷酸肌醇磷脂酶C（PIPLC）	0.09	13.91 - 890.07

 
技术路线图


技术优势：
药典方法：PRM结合SIL肽段是USP <1132.1>指南认可的绝对定量方法，准确度和精密度远超半定量方法
卓越线性范围：所有6种脂肪酶R²均≥0.98，定量范围覆盖0.1-890 ppm，满足从早期工艺到终产品的全阶段检测需求
严格验证标准：准确度误差<35%，精密度%CV<25%，检出限（LOD）低至0.03-0.56 ppm



案例分享

客户1：高风险样品（DS-top）：Fc融合蛋白

• Tween20降解(3个月内完全降解)
• 检出5种脂肪酶，多个酶协同加速吐温降解

蛋白	预测浓度(ng/mL)	%CV
GXVP_A2	1.15	5.2%
LAL	2.76	9.6%
LPL	6.94	2.3%
PIPL_C	<LOD	NA
PL_A1	0.23	3,2%
PLBL2	<LLOQ	12.4

客户2 ：稳定样品（DS-bottom）：单克隆抗体

• 未检测到Tween20降解
• 仅检出PLBL2(3.06 ng/mL)，其余5种均低于检出限

蛋白	预测浓度(ng/mL)	%CV
GXVP_A2	<LOD	NA
LAL	<LOD	NA
LPL	<LOD	NA
PIPL_C	<LOD	NA
PL_A1	<LOD	NA
PLBL2	3.06	3.20%

 
服务方案：
标准服务周期：6周左右（从样品接收到出报告）
加急服务：4周或2周可选（需额外收取费用）
样品需求：通过BCA法定量1 mL DS样品（浓度≥4 mg/ml）
 
如果您对脂肪酶残留检测服务感兴趣，欢迎联系西美杰会第一时间联系您分享更多详细内容。 Cygnus Technologies, LLC.为生物技术和生物制药行业提供产品和分析方法，旨在加速研发阶段和提高产品质量。Cygnus开发和生产的生物工艺残留试剂盒，用于检测超过50种不同表达系统的特异性杂质。Cygnus作为专注于生物技术应用免疫检测的高灵敏度分析技术的专家，Cygnus的产品和服务已经被几乎所有主要的生物制药公司使用超过25年。
 
北京西美杰科技有限公司作为Cygnus在中国总代理，与国内众多知名药企，CRO/CMO企业建立了长久稳定的合作关系。多年来西美杰的产品及服务帮助许多企业加速R&D阶段，提高药物质量、纯度和安全，加速优化研发工艺，减少产品上市时间，降低QC成本。如您对上述产品感兴趣，欢迎致电西美杰客服热线400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。
 

    北京西美杰科技有限公司（Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd，以下简称西美杰）于2006年成立，由留美归国生物领域专业人士创办。西美杰坚持自己的经营理念，勤奋踏实地整合全球产品资源与技术资源，为高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生产企业提供一站式产品服务方案，帮助科研及企业单位缩短科研时间、节约科研成本、提升科研水平、增强企业市场竞争力。

    西美杰以其开放、进取、诚信、专业等优势与国外多家试剂、原料和技术供应商建立了长期稳定的合作伙伴关系，成为了众多国际厂商的中国区总代理、一级代理和中国唯一授权代表处。更与药用辅料生产商长期战略性合作，共同开展制药辅料的进口注册与市场开拓。

    业务的迅猛发展促进了西美杰内部组织架构的不断优化，针对科研客户与企业客户的不同需求，西美杰建立了科研与工业两支独立的营销团队，分别配备专业的技术支持和客服人员，力求为不同类型的客户提供前沿专业的解决方案以及产品与高效的服务。

    经过十多年的发展，西美杰得到了众多客户的支持与信赖，在业务上实现了迅猛发展，以专业的服务成为多家跨国企业中国区研发与生产基地、制药企业与诊断企业以及中科院系统、军科院系统、医科院系统、清华大学、北京大学、北大医学部、首都医科大学等高校与科研院所采购平台的指定供货商。

一、西美杰主营产品线与代理品牌

1. 免疫学：二抗和底物生产商KPL的中国代理；著名抗体生产商Lifespan，Abnova，Cali-Bio，MBL，SAB等近10个品牌的中国一级代理。

2. 分子与细胞生物学：基因库生产商Source Bioscience、德国生化试剂Panreac-AppliChem、德国核苷酸原料品牌Jena Bioscience、外泌体分离专家101Bio等中国总代理；氧化应激检测专业品牌Cell Biolabs、转染试剂专家 Mirus、动物免注射给药工具Alzet等中国总代理或一级代理。

3. 植物学：美国组培试剂品牌Phytotech中国总代理；植物抗体生产商Agrisera、组培抗菌剂专利产品PPM供应商PCT中国一级代理。

4. 蛋白结构学：特色蛋白结晶试剂与耗材Jena Bioscience、Hampton、Anatrace、MiTeGen。

5. 药物筛选开发：检测集团Eurofins的药物筛选服务与产品中国一级代理。

6. 生物制药：覆盖制药从上游到下游环节，全球药用辅料供应商Pfanstiehl(全球重磅生物药中7个药物的辅料供应商)、细胞营养添加物KERRY(全球10大重磅生物药中7个药物的原料供应商)、欧洲制药生化原料供应商Panreac-AppliChem、无抗生素原核表达系统Delphi以及CHO细胞系合约开发PanGen等品牌中国总代理，以及HCP/Prot A/BSA残留检测试剂盒生产商Cygnus等中国制药领域代理。

7. 诊断原料：二抗和底物生产商KPL以及自身免疫抗原抗体生产商Arotec中国总代理，以及免疫诊断原料供应商Meridian和Fitzgerald。

二、西美杰主营产品领域与服务

1. 科研/研发产品及服务项目

    研究领域上：覆盖生物化学、细胞生物学、免疫学、蛋白组学、植物学、分子生物学、药物筛选；

    研究对象上：覆盖人类、动物与模式动物、植物等物种；

    产品结构上：从基因到蛋白质结构与in vivo/in vitro功能的分析和研究；

    产品种类上：从试剂到特殊工具和耗材。

2. 生物工业生产原料、药用辅料

    覆盖培养基生产、生物制药/疫苗生产细胞营养、无抗生素筛选原核表达系统、HCP/Prot A/BSA残留检测试剂盒、检测抗原/抗体/底物/BSA、诊断工业原料。

3. 技术服务、合约开发与技术转让

    稳定表达CHO细胞株的构建与工艺开发；

    培养基优化；

    多肽合成、抗体定制、病毒包装等；

    药物功能筛选服务KinaseProfiler™等。

4. 代理进口服务

     西美杰拥有自主进出口资质，和自有国际物流运输系统，为中国众多大型科研机构提供免税科研仪器和试剂的代理进口服务，我们乐意为客户代理进口在中国没有销售代理的来自全世界的产品。

     西美杰将继续秉承诚信、专业经营之风，整合全球优势产品资源、技术资源和我公司的服务资源，为高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生产企业提供一站式的服务。