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TaqMan探针法基因分型
TaqMan探针法是针对DNA上的SNP位点设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增检测的方法,通常用于少量SNP位点的分析,核酸定量分析以及肿瘤细胞突变分析等。
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TaqMan探针法基因分型

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TaqMan探针法是针对DNA上的SNP位点设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增检测的方法,通常用于少量SNP位点的分析,核酸定量分析以及肿瘤细胞突变分析等。

探针的5’-端和3’-端分别标记一个荧光报告基团(Reporter,如FAM、VIC、HEX等)和一个荧光淬灭基团(Quencher,如TAMRA、BHQ1等)。当荧光探针保持完整时,5′-端报告基团经仪器光源激发的荧光正好被近距离的3′端荧光基团淬灭,仪器检测不到5′端报告基团所激发的荧光信号。

PCR扩增时,加入一对特异引物的同时,加入一对特异性的荧光探针,该探针只与模板特异性地结合,其结合位点在两条引物之间。当溶液中存在DNA目的片段时,荧光探针与模板退火结合,随着PCR的进行,热启动Taq酶在链延伸过程中遇到与模板结合的探针,其5′-3′外切酶活性(此活性是双链特异性的,游离的单链探针不受影响)就会切割探针,释放5′-端报告基团游离于反应体系中,远离3′-端荧光淬灭基团的屏蔽,破坏两荧光分子基团间的能量转移(FRET),因此5′-端报告基团受激发所发射的荧光信号就可以被探头检测到。每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号累积与PCR产物形成的同步,荧光信号的强度能够代表模板DNA的拷贝数。

 

Taqman 的图像结果

技术原理

 

 

结果示例

 

查看源图

 

服务内容

 

1、基因和SNP序列信息分析。

2、实验方案讨论与确定。

3、引物和探针的设计优化。

4、引物和探针的合成。

5、qPCR实验。

6、数据分析整理。

7、报告生成。

 

我们的优势

1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。

2、专业的操作人员。

3、高规格实验室。

4、数据结果交付周期快。

5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。

 

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