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western-blotting(WB/免疫印迹/蛋白质印迹)、免疫共沉淀CO-IP、二维电泳、质谱
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1、WB技术服务
Western Blotting即蛋白质印迹,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达信息,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
技术路线、服务周期
2、免疫共沉淀
免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)是一种在体外探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相互作用的话,那么当用一种蛋白的抗体进行免疫沉淀时,另一个蛋白也会被同时沉淀下来。与酵母双杂交技术不同,免疫共沉淀技术所利用的是抗原和抗体间的免疫反应,是一种基于体外非细胞的环境中研究蛋白质与蛋白质的相互作用的方法。
相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
实验步骤、服务周期。
3、蛋白质双向电泳
蛋白质双向电泳是将蛋白质等电点和分子量两种特性结合起来进行蛋白质分离的技术。蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦(Isoelectrofocusing, IEF),根据蛋白质的等电点不同进行分离;第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后,可以得到蛋白质分子的等电点和分子量信息。
因而具有较高的分辨率和灵敏度,已成为蛋白质特别是复杂体系中的蛋白质检测和分析的一种强有力的生化手段。
实验步骤、服务周期、结果示意图
4、质谱分析
蛋白质谱鉴定是蛋白质组学研究的核心技术之一,根据其检索方式的不同又分为肽指纹图谱检索(Peptide MassFingerprint,PMF)、序列检索(Sequence Query)以及串联质谱离子检索(MS/MS Ion Search)等鉴定方法。其中串联质谱离子检索已逐渐取代肽指纹图谱检索,成为目前最常用的质谱鉴定方式,其丰富的肽段碎片质谱信息使得即使对于混合蛋白以及大数据库检索也能获得很可靠的结果。
服务周期
上海钰森生物技术有限公司成立10多年,专注科研服务,建立了自己的实验技术平台,能够提供动物造模、细胞培养、细胞实验(细胞染色、侵袭、趋化、转移、增殖、活性、凋亡等)、免疫印迹(WB)、PCR和Q-PCR、免疫组化(IHC-P/F)、免疫共沉淀(Co-IP)、质粒构建、病毒包装、RNA干扰……多项单项实验技术服务和课题总包服务,是国内自建较全面基础实验平台、最早从事生物技术服务为数不多的公司之一。
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