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检测组织或细胞中特定目的蛋白的表达水平。
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实验目的：检测组织或细胞中特定目的蛋白的表达水平。
实验原理：将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。其中的步骤包括蛋白样本提取制备，蛋白定量，电泳，转膜与显色。
实验内容与方法：
1、 蛋白提取：根据需要测定的目的蛋白主要来源（胞浆、胞核或者全蛋白），区分组织提取或者细胞提取，选取相应的试剂盒。
2、 蛋白定量：bradford法、BCA法或lowery法测定出所提取的蛋白含量。
3、 蛋白变性：5×电泳上样缓冲液，煮沸5~10分钟。
4、 凝胶电泳：垂直电泳分离出目的蛋白条带。
5、 转膜：将SDS丙烯酰胺中的蛋白通过水平电泳的方式转移到PVDF或者NC膜上。
6、 免疫反应：目的蛋白分别与相应的一抗、二抗结合。
7、 显色反应：通过化学发光法将蛋白条带显影至胶片上。
（1）样本材料：
新鲜或冷冻细胞不少于106个，新鲜或冷冻组织样本不少于50 mg。
已提取的蛋白样品蛋白含量不低于0.1ug/ul。
（2）试剂：蛋白提取与定量可根据客户要求选用特定试剂盒，如客户不提供
试剂盒且无特别要求，则选用凯基公司相应试剂盒产品。一抗二抗反应所用抗体客户自备，凯基也可以提供抗体代订服务。
实验周期：（2-8周，视样本数量而定）
服务报告：提交实验报告书（包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析）、原始数据、图片，文本或电子版。
收费标准：
全蛋白提取 （全蛋白提取及蛋白定量结果，80元/样）
核蛋白提取 （核蛋白提取及蛋白定量结果，100元/样）
膜蛋白提取 （膜蛋白提取及蛋白定量结果，200元/样）
预实验 （自行提供一抗，800元/膜）
正式实验 （自行提供一抗，1000元/膜，每张膜最多8个样）
手机版：蛋白免疫印记杂交（WB）服务
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