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冰冻切片染色
冰冻切片染色
服务类别:免疫与抗体总访问:4097
最后更新:2021-1-6半年访问:65
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冰冻切片的免疫组化染色步骤
速冻组织
将组织块平放于软塑料盖或特制小盒内(直径2cm),如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内,当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮内,大约10-20秒组织即迅速冰冻成块.取出组织冰块立即置入-80℃冰箱储存备用,或置于恒冷切片机冰冻切片.冰冻切片4~8mm,冰冻切片后如不染色,必须吹干,储存低温冰箱内,或进行短暂预固定后储存冰箱内保存.室温放置30分钟后,入4℃丙酮固定10分钟.也可根据需要选择其它的固定方式.PBS洗,5分钟×3.用3%过氧化氢孵育5~10分钟,消除内源性过氧化物酶的活性.PBS洗,5分钟×3.下接石蜡切片免疫组化染色操作步骤(滴加一抗开始).
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