检测原理
本试剂盒采用TaqMan探针法荧光定量PCR技术,针对组织胞浆菌(包括荚膜组织胞浆菌及其变种)的高度保守基因序列设计特异性引物和探针,通过实时荧光信号扩增曲线定量检测样本中的病原体核酸。
产品特点
高灵敏度:可检测低至个位拷贝数的靶基因,适用于微量样本分析。
强特异性:引物及探针经严格优化,避免与其他病原体核酸发生交叉反应。
稳定性优:复孔间变异系数(CV)<5%,实验结果重复性高。
快速便捷:即开即用,用户仅需提供样本RNA或DNA模板。
配套完善:含阳性对照(标准品)和内参系统,便于区分假阴性结果。
适用范围
科研用途:适用于临床前研究、流行病学调查及实验室验证。
样本类型:新鲜或冷冻组织(避免反复冻融)、血液、培养物等。
试剂盒组分
| 组分名称 | 规格(50次反应) | 保存条件 |
| PCR反应预混液 | 1 mL | -20℃避光 |
| 探针及引物混合液 | 200 μL | -20℃避光 |
| 阳性对照 | 50 μL | -20℃(单独保存)|
| RNase-free水 | 1 mL | 室温 |
操作步骤
样本处理:
使用新鲜样本或-80℃保存的RNA/DNA,避免反复冻融。
按标准方法提取核酸,建议浓度≥10 ng/μL。
PCR体系配制(20 μL/反应):
预混液10 μL + 探针引物混合液2 μL + 模板5 μL + RNase-free水3 μL。
扩增程序:
预变性:95℃ 3 min → 循环阶段(40次):95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec(荧光采集)。
数据分析:
使用仪器配套软件分析Ct值,通过标准曲线计算拷贝数。
注意事项
避免Buffer AL等试剂低温沉淀,使用前需室温平衡或37℃预热。
扩增片段建议控制在1 kb以内以确保效率。
电泳时禁用含SDS的Loading Buffer,防止拖尾现象。
本产品仅限科研,不可用于临床诊断。
储存与运输
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
运输方式:低温干冰运输,确保试剂活性。
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