鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

Name: 鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
Brand: 谷研
SKU: 50T

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销售商：上海谷研实业有限公司

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR（qPCR）技术，专用于鱼类源性成分的定性与定量检测，适用于科研场景。试剂盒包含优化的预混反应体系、阳性对照（无传染性DNA片段）及标准曲线制备所需组分，可实现对目标DNA的高灵敏度检测（线性范围≥5个数量级）。

技术原理

通过特异性探针与靶序列结合，在扩增过程中释放荧光信号，实时监测PCR进程，结合标准曲线对样本中的DNA进行绝对定量或相对定量分析。

组分与规格

反应体系：50次20μL反应

包含组分：

预混PCR缓冲液（含酶、dNTPs等）

鱼源性成分特异性引物及探针

阳性对照DNA（1×10^8拷贝/μL）

荧光PCR模板稀释液

阴性对照（无DNA模板）

操作步骤

样本制备

使用兼容的核酸纯化方法提取样本DNA，建议设置N+2个提取管（含阳性/阴性对照）。

样本需保存于液氮、干冰或Trizol液中，避免反复冻融。

标准曲线制备（定量分析）

标记6管，依次稀释阳性对照至10^2–10^7拷贝/μL（10倍梯度）：

取45μL稀释液分装至各管；

加入5μL阳性对照至最高浓度管（10^7拷贝/μL），涡旋混匀后依次梯度稀释。

注意：稀释操作需在独立区域进行，避免交叉污染。

qPCR反应设置

定量分析：需N+9个反应管（样本、阴性对照、6个标准曲线点）。

定性分析：仅需1个标准曲线点（推荐10^4拷贝/μL）。

反应程序：按常规两步法qPCR条件（95℃预变性，40循环扩增）。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域完成。

防污染措施：使用带滤芯枪头、专用工作服及一次性手套。

试剂保存：避光存放，使用前充分混匀并短暂离心。

质量控制：每批次实验需包含阴/阳性对照，标准曲线R²≥0.98。

应用范围

样本类型：组织、血液、加工食品等含鱼源性成分的样本。

检测目标：特定鱼类物种的DNA序列。
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