内耳应用中AAV（腺相关病毒）血清型的选择

AAV载体凭借其高安全性，低免疫原性等优势，可以安全地转导中枢神经系统和感官系统，并在多种疾病的基因治疗中显示出巨大潜力，这为遗传性耳聋的治愈带来了新的希望。目前，已有多项研究表明，使用AAV作为基因治疗载体可以部分或完全恢复遗传性耳聋小鼠模型的听力。上期内容，我们分享了关于AAV在内耳应用中的启动子和注射方式的选择策略，本期我们将继续分享内耳应用中AAV血清型的选择。

1、新生小鼠

①传统AAV血清型中，AAV1是新生小鼠内耳基因传递使用最广泛的血清型之一，可转导毛细胞、支持细胞、血管纹、前庭神经上皮多种细胞类型，并且通过圆窗膜注射方式可高效转导内毛细胞。其它血清型AAV2、AAV6、AAV8、AAV9以不同的效率感染新生小鼠耳蜗内毛细胞（图1）。

相比其它天然AAV，AAV1在体外可高效转导离体培养的小鼠耳蜗毛细胞

②与传统的AAV血清型相比，变体Anc80L65可介导靶基因在新生小鼠外毛细胞和内毛细胞中的高效稳定传递（图2）。

相比传统AAV血清型，Anc80L65在体外可高效转导小鼠耳蜗外毛细胞和内毛细胞

相比传统AAV血清型，Anc80L65在体内可高效转导新生小鼠耳蜗内毛和外毛细胞

③经后半规管注射后，变体AAV2.7m8可在体内高效转导新生小鼠外毛细胞和内毛细胞，并且在外毛细胞转导方面明显优于Anc80L65（图4）。此外，AAV2.7m8还能够感染支持细胞亚群(内柱细胞和内指细胞)(图5），这些支持细胞亚群被认为能够高效促进毛细胞再生。

AAV2.7m8在体内高效感染新生小鼠耳蜗外毛细胞和内毛细胞

AAV2.7m8在体内高效感染新生小鼠内耳支持细胞

④经胞囊注射后，相比Anc80L65和AAV2.7m8，AAV9-PHP.B在内毛细胞和外毛细胞中均具有强的转导效率，并在螺旋和前庭神经节神经元中显著转导。

AAV9-PHP.B在体内高效感染新生小鼠耳蜗外毛细胞和内毛细胞

⑤通过RWM注射，新型突变体AAV-ie-K558R可以强烈诱导新生小鼠耳蜗中HC样细胞的再生

AAV-ie-K558R-Atoh1可在新生小鼠体内再生HC样细胞

2、成年小鼠

在成年小鼠中，相比于AAV1、AAV8、AAV9和Anc80L65血清型，AAV2可同时高效转导内毛细胞和外毛细胞，其次是Anc80L65血清型（图8）。

AAV2高效转导成年小鼠耳蜗毛细胞