利用施万细胞PIK3CA突变构建神经病变模型，用于早期靶向治疗研究
摘要
PIK3CA 相关疾病因胚胎期体细胞功能获得性突变引发，常累及周围神经导致严重神经症状，机制尚不明确。本研究构建施万细胞特异性 PIK3CA 功能获得性突变小鼠模型，成功复刻患者临床特征，发现突变施万细胞通过非细胞自主效应与邻近细胞跨界通讯，驱动脂肪组织过度生长、毛囊增生及有氧糖酵解代谢重编程。早期给予 PIK3CA 抑制剂阿培利司可显著改善症状、延长生存期，而延迟治疗因药物难以穿透髓鞘疗效受限。该研究揭示了疾病发病新机制，为 PIK3CA 相关神经病变的精准治疗提供了关键实验依据。
方法
本研究遵循动物实验伦理规范，通过杂交 R26StopFLP110 * 小鼠与 MPZ-Cre 小鼠，构建施万细胞特异性 PIK3CA 功能获得性突变（PIK3CA^MPZ-Cre+）小鼠模型，以同窝阴性小鼠为对照。采用行为学测试（旷场实验、握力测试）评估神经功能，通过 HE 染色、半薄切片、透射电镜观察神经及周围组织形态。分子影像方面，运用 nanoScan PET-CT 进行 FDG 显像检测代谢变化，MRI 评估神经鞘体积及皮肤厚度。采用 Western blot、免疫荧光验证信号通路激活，代谢组学分析血浆代谢物变化，同时开展阿培利司不同时间点给药的治疗实验。
分子影像设备应用情况
采用 nanoScan PET-CT 设备进行 FDG-PET/CT 显像，小鼠禁食过夜后麻醉，经尾静脉注射 FDG，45 分钟后采集全身 PET-CT 数据，通过 PMOD 软件勾画坐骨神经等感兴趣区，计算标准化摄取值（SUV）量化葡萄糖摄取。使用 MRI 设备进行全身 T2 加权脂肪抑制序列扫描及脑部聚焦扫描，借助 IntelliSpace Portal 软件和 3D Slicer 手动分割，计算周围髓鞘体积及皮肤厚度。
分子影像设备实验结果
FDG-PET/CT 显像显示，PIK3CA^MPZ-Cre + 小鼠坐骨神经、臂丛神经的 FDG 摄取量显著高于对照组，证实突变小鼠周围神经存在有氧糖酵解代谢偏移（Fig. 3F）。MRI 检测发现，突变小鼠神经鞘弥漫性肥厚，皮肤厚度显著增加，与病理观察到的神经增大、周围脂肪组织异常增生结果一致，为疾病表型提供了无创可视化证据。
原文Fig. 3F：FDG-PET/CT 显像定量分析图，清晰展示 PIK3CA 突变小鼠坐骨神经和臂丛神经的 FDG 摄取量显著升高，直观呈现神经组织有氧糖酵解代谢特征
研究结果
原文Fig. 1H：坐骨神经大体标本及半薄切片图，直观显示 PIK3CA 突变小鼠神经显著增大，横截面积增加且有髓纤维密度降低
结论
本研究首次明确施万细胞 PIK3CA 功能获得性突变是导致周围神经病变的核心原因，其通过非细胞自主效应调控邻近组织生长及代谢重编程，为疾病发病机制提供了全新视角。研究证实阿培利司对突变相关神经病变具有治疗潜力，但疗效高度依赖治疗时机，早期干预可有效改善预后，而髓鞘成熟后药物穿透受限导致延迟治疗效果不佳。该发现不仅为 PIK3CA 相关神经病变的临床治疗提供了关键参考，也为开发跨细胞通讯靶向药物、优化治疗窗口提供了重要实验基础。
原文Fig. 4A：K不同时间点给予阿培利司治疗后，突变小鼠的生存获益差异
①原文出处DOI：10.1073/pnas.2424867122
②原文链接：https://www.pnas.org/doi/10.1073/pnas.2424867122
PIK3CA 相关疾病因胚胎期体细胞功能获得性突变引发，常累及周围神经导致严重神经症状，机制尚不明确。本研究构建施万细胞特异性 PIK3CA 功能获得性突变小鼠模型，成功复刻患者临床特征，发现突变施万细胞通过非细胞自主效应与邻近细胞跨界通讯，驱动脂肪组织过度生长、毛囊增生及有氧糖酵解代谢重编程。早期给予 PIK3CA 抑制剂阿培利司可显著改善症状、延长生存期，而延迟治疗因药物难以穿透髓鞘疗效受限。该研究揭示了疾病发病新机制，为 PIK3CA 相关神经病变的精准治疗提供了关键实验依据。
方法
本研究遵循动物实验伦理规范，通过杂交 R26StopFLP110 * 小鼠与 MPZ-Cre 小鼠，构建施万细胞特异性 PIK3CA 功能获得性突变（PIK3CA^MPZ-Cre+）小鼠模型，以同窝阴性小鼠为对照。采用行为学测试（旷场实验、握力测试）评估神经功能，通过 HE 染色、半薄切片、透射电镜观察神经及周围组织形态。分子影像方面，运用 nanoScan PET-CT 进行 FDG 显像检测代谢变化，MRI 评估神经鞘体积及皮肤厚度。采用 Western blot、免疫荧光验证信号通路激活，代谢组学分析血浆代谢物变化，同时开展阿培利司不同时间点给药的治疗实验。
分子影像设备应用情况
采用 nanoScan PET-CT 设备进行 FDG-PET/CT 显像，小鼠禁食过夜后麻醉，经尾静脉注射 FDG，45 分钟后采集全身 PET-CT 数据，通过 PMOD 软件勾画坐骨神经等感兴趣区，计算标准化摄取值（SUV）量化葡萄糖摄取。使用 MRI 设备进行全身 T2 加权脂肪抑制序列扫描及脑部聚焦扫描，借助 IntelliSpace Portal 软件和 3D Slicer 手动分割，计算周围髓鞘体积及皮肤厚度。
分子影像设备实验结果
FDG-PET/CT 显像显示，PIK3CA^MPZ-Cre + 小鼠坐骨神经、臂丛神经的 FDG 摄取量显著高于对照组，证实突变小鼠周围神经存在有氧糖酵解代谢偏移（Fig. 3F）。MRI 检测发现，突变小鼠神经鞘弥漫性肥厚，皮肤厚度显著增加，与病理观察到的神经增大、周围脂肪组织异常增生结果一致，为疾病表型提供了无创可视化证据。
原文Fig. 3F：FDG-PET/CT 显像定量分析图，清晰展示 PIK3CA 突变小鼠坐骨神经和臂丛神经的 FDG 摄取量显著升高，直观呈现神经组织有氧糖酵解代谢特征研究结果
- 突变小鼠自 P21 起出现震颤、毛发异常、运动能力下降等神经症状，随年龄增长进展为体重减轻、慢性低血糖，中位生存期仅 16 周，坐骨神经显著增大且髓鞘结构异常。
- 突变仅发生于施万细胞，却驱动邻近脂肪细胞 AKT 通路激活、毛囊增生，证实存在非细胞自主跨界通讯效应。
- 突变小鼠血浆代谢组呈现乳酸、丙酮酸升高的 Warburg 效应特征，周围神经 FDG 摄取显著增加，提示代谢重编程。
- 阿培利司早期给药（P10 起始）可显著改善神经症状、减少异常髓鞘纤维，延迟给药（P60 起始）因药物难以穿透髓鞘疗效不佳。
原文Fig. 1H：坐骨神经大体标本及半薄切片图，直观显示 PIK3CA 突变小鼠神经显著增大，横截面积增加且有髓纤维密度降低结论
本研究首次明确施万细胞 PIK3CA 功能获得性突变是导致周围神经病变的核心原因，其通过非细胞自主效应调控邻近组织生长及代谢重编程，为疾病发病机制提供了全新视角。研究证实阿培利司对突变相关神经病变具有治疗潜力，但疗效高度依赖治疗时机，早期干预可有效改善预后，而髓鞘成熟后药物穿透受限导致延迟治疗效果不佳。该发现不仅为 PIK3CA 相关神经病变的临床治疗提供了关键参考，也为开发跨细胞通讯靶向药物、优化治疗窗口提供了重要实验基础。
原文Fig. 4A：K不同时间点给予阿培利司治疗后，突变小鼠的生存获益差异①原文出处DOI：10.1073/pnas.2424867122
②原文链接：https://www.pnas.org/doi/10.1073/pnas.2424867122
