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DNA定量方法对比:分光光度法与荧光染色法

浏览次数:1943 发布日期:2023-9-5  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负

无论您想通过qPCR分析基因表达,还是通过下一代测序探索遗传易感性,准确定量DNA都是分子生物学研究的重要一环。

随着检测方法的多样化,如何选择成为难点。比较常用的有基于吸光度的方法,以及各种基于荧光的DNA定量方法。

 

通常来讲,荧光染色法更具特异性,并且能够检测更低浓度的DNA样本。但即使在基于荧光的方法中,不同试剂盒适用的检测浓度范围也存在差异。

 

为此,我们使用BMG LABTECH的FLUOstar®Omega、VANTAstar®和CLARIOstar®Plus酶标仪,配合不同规格的微孔板,对三种常用的荧光定量试剂盒(Qubit™ dsDNA BR、Qubit™ dsDNA HS和Quant-iT™ Picogreen™) 以及基于吸光度的DNA定量进行比较。

 

具体实验步骤见我们的应用指南:DNA quantification using absorbance (A260) and fluorescent methods (Qubit™ and Quant-iT™/PicoGreen™)

 

我们根据检测结果计算出三种试剂盒与分光光度法的检测限,结果如下图所示。

 

可以看出,BMG LABTECH多功能酶标仪与常用的DNA定量方法兼容,是检测双链DNA的可靠仪器,适用DNA样品浓度范围较广,可低至每孔0.8pg。
 

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