CEM 公司Discover® 2.0在氨基酸水解中的应用

               
                                           

氨基酸分析用于定量各种样品中的一组基本的营养素。 为了为所有氨基酸的定量提供可靠、可重现和准确的方法，必须同时考虑样品处理和色谱分离。 在样品处理中，样品必须被水解，以便可以测量氨基酸的比例。 可以使用多种水解方案，因为并非所有氨基酸都同样稳定。每个样品必须经过三种不同的水解方案，即用于确定总蛋白质组成的酸水解、用于测量含硫氨基酸的过甲酸氧化后的酸水解以及用于评估色氨酸回收率的碱水解 。这些水解技术可能非常耗时，完成一个样品需要长达 24 小时，并且可能还需要特殊设备。
使用美国CEM公司Discover微波氨基酸水解仪器，可以大大改善对水解条件的控制，并具有更好的准确性、重现性、速度和稳健性。
                                                 
         图 1. CEM Discover 2.0 Microwave Reaction System with Explorer Autosampler 

CEM Discover 2.0（图 1）使用专利环形单模微波技术水解蛋白质和多肽，为氨基酸分析做准备，最快 15 分钟完成。

                                              

1. 内置革命性的，专利的iWave 温度传感器，可提供样品本身的准确温度读数。
2. 自动耦合微波腔，微波能量分布自动调整，微波能量可以快速加热和维持每个样品的设定温度；
3. 优越的风机系统的性能，完全可调的在线搅拌，均匀的热量分布；
4. 使用简单的软件操作系统；
5.  集成500万像素的摄像头；
6. 全自动反应操作，自动采样器有12个和48个位置模块，提供完全自动化的反应处理能力；

                                    

                                               图 2. CEM Discover 2.0

如图3 所示，样品温度由获得专利的测量， 原位搅拌确保热量均匀分布在样品中，反应后可在几秒钟内冷却样品，以便为进一步处理或分析做好准备。
          

                              

图3. Process of Microwave Hydrolysis in CEM Discover 2.0

                                             
 

• 称量300-500 mg样品到 35 mL 小瓶中。
• 加入 10 mL 6N HCl。
• 盖上瓶盖。
• 使用动态方法控制，设定 0-300 W功率、15 分钟保持时间、160 °C目标温度 和 300 psi 目标压力条件，搅拌应设置为中速。
• 将样品瓶放入 Discover微波腔并按 Start 键开始方法。

                                           

建议使用上述程序中概述的正确样品量、体积和容器。 样品的某些成分在水解后会保留在固相中，并且在此过程中通常会变黑，如图 4 所示。这种情况是正常的，氨基酸会在溶液中。