大鼠Elisa试剂盒注意事项5点的方法

大鼠Elisa试剂盒操作步骤：

1.  使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
 
2.  根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
 
3.  加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入大鼠Elisa试剂盒待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
 
4.  甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
 
5.  每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
 
6.  甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
 
7.  每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
 
8.  取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
 
9.  在450nm波长处测定各孔的OD值。

大鼠Elisa试剂盒使用注意：
 
1.不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用试剂盒严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性.
 
2.若不同批号大鼠Elisa试剂盒的不同组分(A液或酶工作液)，或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。
 
3.反应时间的误差，做大量标本时，*孔和zui后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。
 
4.临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。
 
5.加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响极大，建议校对加样器。