Linsitinib助力精准阻断IGF-1R信号轴，揭示肿瘤增殖与病毒融合新靶点

▲Linsitinib (T6017，CAS: 867160-71-2 ）的化学结构式

Linsitinib (T6017)，CAS: 867160-71-2 是一种可口服给药的小分子抑制剂，选择性靶向胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）及胰岛素受体（IR）酪氨酸激酶，具有良好的口服生物利用度，用于调控IGF-1R/IR信号轴，并在实验体系中展现出抑制肿瘤细胞增殖的效用。通过阻断IGF-1R的催化活性，Linsitinib 抑制受体自磷酸化及IRS与Shc等衔接蛋白的磷酸化，从而削弱PI3K–AKT–mTOR与RAS–RAF–MEK–ERK等经典级联通路的激活。在常见IGF-1R高表达、由其驱动增殖、促转化并抑制凋亡的肿瘤来源模型中，该上游阻断可降低促有丝分裂与生存信号，导致生长受限并诱导细胞凋亡[1,2]。

在胰岛素/IGF受体家族中，IGF-1R、胰岛素受体（IR）以及胰岛素受体相关受体（IRR）共同构成整合营养与生长信号的网络。IGF-1或IGF-2与IGF-1R结合后触发跨自磷酸化，形成磷酪氨酸对接位点，并向AKT依赖的生存/代谢程序与ERK依赖的增殖程序分流。IGF-1R还通过上调Cyclin D并经AKT磷酸化BAD、调控FOXO转录因子来促进细胞周期推进并抑制促凋亡机制[2]。鉴于受体家族间的串扰及与IR形成混合受体的可能性，实验设计通常同时考量IGF/胰岛素输入与经mTORC1/S6K反馈至IRS的调控，这些因素会重塑受体敏感性。

Linsitinib 通过阻断IGF-1R的起始酪氨酸激酶事件，降低AKT与ERK的磷酸化及其维持增殖与生存的转录输出[1]。在功能层面，可观察到DNA合成与克隆形成能力下降，并在依赖IGF-1R信号的细胞中恢复凋亡表型。作为研究工具，Linsitinib 适用于：（i）在按IGF-1R表达或IGF配体自分泌分层的细胞谱系中验证IGF-1R依赖性；（ii）时间维度上解析上游抑制后S6K至IRS等反馈与通路可塑性；以及（iii）与mTOR、MAPK或细胞周期抑制剂的联用研究，以描绘补偿性网络并定位IGF-1R在适应性层级中的位置[1,2]。其标注的受体范围包含IGF-1R、IR与IRR，便于在更广义的胰岛素/IGF受体家族背景下开展干预与对照。结合磷酸化IGF-1R、AKT、ERK，凋亡标志物与细胞周期调控因子等读出，可将受体阻断与表型变化建立定量关联，从而界定通路占优与敏感性的机制性生物标志[1,2]。

■ 2. 文献分享
■ 2.1 IGF1R Contributes to Cell Proliferation in ALK-Mutated Neuroblastoma with Preference for Activating the PI3K-AKT Signaling Pathway

▲  IGF1R抑制对下游AKT及ERK1/2信号通路的影响。（A）ALK驱动的CLB-BAR细胞经梯度浓度GSK1904529A（简称GSK）处理2 h后，以指定抗体进行免疫印迹分析；（B–D）相同处理及分析在CLB-GAR、CLB-GE及NB1细胞系中重复。磷酸化ALK及磷酸化IGF1R抗体分别用于指示ALK与IGF1R的活化状态，膜条剥离后重新探针检测总蛋白水平。磷酸化AKT及磷酸化ERK1/2抗体用于指示IGF1R抑制对下游PI3K-AKT及RAS-MAPK信号通路的影响。Tubulin作为上样对照。未裁剪的原始膜条见File S1。

Linsitinib (T6017) 在本研究中被明确为IGF1R抑制剂。作者指出其与另一种IGF1R抑制剂共同被采用，且两者对IGF1R与InsR具有相近的IC50范围，表明对这两类受体酪氨酸激酶均具靶向活性。在以ALK驱动的神经母细胞瘤细胞模型中，Linsitinib在两种设定浓度下单独使用时，仅抑制其相应靶标受体的磷酸化，作者据此认为其选择性较高。通过在这些条件下特异性阻断目标受体的磷酸化，Linsitinib被用于解析细胞系统中由IGF1R/InsR介导的信号输入。研究还在材料与方法关联处明确提及Linsitinib作为IGF1R相关实验所使用的抑制剂。综合这些已报告结果，Linsitinib在本研究中的作用被界定为对IGF1R具有选择性抑制，并对InsR亦具活性；在所述的ALK驱动神经母细胞瘤细胞实验条件下，Linsitinib能够选择性地抑制其靶标受体的磷酸化。[3]

■ 2.2 A systems‐level study reveals host‐targeted repurposable drugs against SARS‐CoV‐2 infection

▲ 定量系统药理学方法筛选候选化合物的实验流程图。（A）输入SARS-CoV-2感染A549细胞及ACE2过表达A549细胞的RNA-seq数据；（B）筛选上调和下调差异表达基因（DEGs）；（C）通过GO富集分析手动注释抗病毒和抗细胞因子基因特征；（D）从CMap中提取最能复现上述基因特征的化合物；（E）利用QuartataWeb识别化合物的已知及预测靶点；（F）构建由四个SARS-CoV-2感染相关模块组成的宿主反应网络；（G）通过BioSNAP肺PPI网络进行网络邻近性分析，对各模块排序前25种候选药物；（H–I）基于化合物与靶点的相互作用模式进行聚类，从各聚类及手动筛选中选择代表性化合物用于实验验证。

Linsitinib (T6017) 被描述为胰岛样生长因子1受体抑制剂，并在研究中被报告为所测试化合物中效力最强的药物。在评估细胞间融合的实验中，Linsitinib 对合胞体形成呈剂量依赖性抑制，且这一抑制效应并未与细胞损失相对应，提示其对融合过程的抑制并非简单源于细胞毒性。进一步的结果显示，Linsitinib 可实现对细胞融合的完全抑制，而仅观察到部分细胞损失，且其剂量反应曲线出现平台期，支持其对融合过程具有特异性影响。在定量方面，Linsitinib 在细胞融合实验中的 EC50 为 25 µM。
 

▲ 合胞体实验中候选化合物的剂量-反应曲线。HEK293受体细胞转染或不转染ACE2及TMPRSS2，种于384孔板中，以7点梯度待测化合物预处理1–2 h后，与表达SARS-CoV-2刺突蛋白及GFP的HEK293供体细胞（或仅表达GFP的供体细胞）共培养4 h。通过共聚焦高内涵成像仪采集GFP阳性图像，利用CNT算法分析合胞体形成及整合GFP面积（总GFP）作为细胞毒性指标。数据汇总自8次独立生物学重复，误差线表示至少3次实验中相同浓度下的SD。

除实验观察外，研究的计算分析亦将 Linsitinib 优先化：其被选为潜在的抗病毒化合物，并进一步被鉴定为具有很高 Connectivity Map 评分（−99.37）的抗炎化合物，从而支持其作为重点候选者在宿主靶向调控框架中的地位。上述结果共同表明，Linsitinib 以明确的效价强力抑制刺突蛋白驱动的细胞融合，并在转录组匹配分析中同时展现出抗病毒与抗炎特征。[4]

■ 3. 结语
Linsitinib通过选择性抑制胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）的酪氨酸激酶活性，阻断受体自磷酸化及其下游PI3K–AKT–mTOR和RAS–RAF–MEK–ERK信号通路。文献报道显示，Linsitinib有效抑制IGF-1R及胰岛素受体的磷酸化，降低肿瘤模型（如ALK驱动神经母细胞瘤）中的增殖与存活信号。此外，Linsitinib在SARS-CoV-2感染模型中表现出强效抑制刺突蛋白介导的细胞融合，且具备抗病毒及抗炎转录组特征。未来研究可聚焦于与mTOR、MAPK或细胞周期抑制剂的联合应用，揭示补偿性信号网络，验证其在不同肿瘤亚型中的疗效，并深入探讨其抗病毒机制与治疗潜力。

■ 4. Q&A
Q1: Linsitinib的主要作用机制是什么？
A1: Linsitinib选择性抑制IGF-1R的酪氨酸激酶活性，阻断受体自磷酸化及下游PI3K–AKT–mTOR和RAS–RAF–MEK–ERK信号通路的激活，从而降低细胞增殖与存活信号。

Q2: Linsitinib在肿瘤模型，特别是ALK驱动的神经母细胞瘤中有哪些表现？
A2: 在ALK驱动的神经母细胞瘤细胞模型中，Linsitinib能够选择性抑制IGF1R和胰岛素受体的磷酸化，减少这些受体介导的信号输入，抑制细胞增殖与存活。

Q3: 最新研究中Linsitinib表现出哪些抗病毒效果？
A3: Linsitinib在SARS-CoV-2感染模型中剂量依赖性抑制刺突蛋白驱动的细胞融合，且抑制效应不伴随细胞毒性，同时表现出抗病毒和抗炎的转录组特征，显示其作为宿主靶向抗病毒药物的潜力。

■ 5. 参考文献
[1] Mulvihill MJ, Cooke A, Rosenfeld-Franklin M, Buck E, Foreman K, Landfair D, et al. Discovery of OSI-906: a selective and orally efficacious dual inhibitor of IGF-1R and IR. J Med Chem. 2009;52(24):7472-7480.
[2] Pollak M. Insulin and insulin-like growth factor signalling in neoplasia. Nat Rev Cancer. 2008;8(12):915-928.
[3] Guan J, Borenäs M, Xiong J, Lai W, Palmer R, Hallberg B. IGF1R Contributes to Cell Proliferation in ALK-Mutated Neuroblastoma with Preference for Activating the PI3K-AKT Signaling Pathway. Cancers. 2023;15(17):4252.
[4] Chen F, Shi Q, Pei F, Vogt A, Porritt R, Garcia G, et al.. A systems‐level study reveals host‐targeted repurposable drugs against SARS‐CoV‐2 infection. Molecular Systems Biology. 2021;17(8):.