实验小鼠繁育管理实操指南：个体标识、笼卡规范、配繁策略与妊娠确认
上一期文章回答了"小鼠是什么、怎么选、什么等级、到货怎么验收"。鼠已进笼、适应期也过了，这一期接着讲接手之后最要紧的五件事：怎么把每只小鼠记清楚、笼卡上该写什么、什么时候可以让它们合笼、检栓法检查的是什么、见栓就等于怀孕吗。
Q1: 小鼠几十只，怎么编号才不会乱？
编号的目的是"个体可追溯"，方法选择主要取决于小鼠日龄和实验周期。常用的有四种。
断趾编号法
适用于出生 7 日龄以内的幼鼠。此阶段趾骨尚未完全骨化，且外周神经系统尚未完全髓鞘化，痛觉传导显著减弱，因此可在无麻醉条件下操作。
编号规则：小鼠前肢每侧 4 趾、后肢每侧 5 趾；后肢自左至右依次为 1–9 号，前肢自左至右依次为 10–80 号。例如 58 号小鼠，即剪断 50 号趾与 8 号趾。
需要提醒的是，断趾通常有两条限制：一是每只脚只剪 1 个趾（部分机构允许后脚最多 2 个），二是优先后脚、前脚的第一趾不宜剪除，否则可能会影响抓握能力。另外，断趾法通常与基因型鉴定结合使用，纯作编号手段时需评估该方案是否影响小鼠的正常生理活动等；操作器械须在动物之间清洁消毒，以防 DNA 交叉污染导致基因型误判。
Q1: 小鼠几十只，怎么编号才不会乱？
编号的目的是"个体可追溯"，方法选择主要取决于小鼠日龄和实验周期。常用的有四种。
断趾编号法
适用于出生 7 日龄以内的幼鼠。此阶段趾骨尚未完全骨化，且外周神经系统尚未完全髓鞘化，痛觉传导显著减弱，因此可在无麻醉条件下操作。
编号规则：小鼠前肢每侧 4 趾、后肢每侧 5 趾；后肢自左至右依次为 1–9 号，前肢自左至右依次为 10–80 号。例如 58 号小鼠，即剪断 50 号趾与 8 号趾。
需要提醒的是，断趾通常有两条限制：一是每只脚只剪 1 个趾（部分机构允许后脚最多 2 个），二是优先后脚、前脚的第一趾不宜剪除，否则可能会影响抓握能力。另外，断趾法通常与基因型鉴定结合使用，纯作编号手段时需评估该方案是否影响小鼠的正常生理活动等；操作器械须在动物之间清洁消毒，以防 DNA 交叉污染导致基因型误判。
用专门的耳孔机在小鼠耳朵边缘打出小缺口（0.5–2 mm）或在耳中打孔，一般以左耳标记十位、右耳标记个位，逢整百数在耳中部打孔标记。
适用年龄为断奶后及成年小鼠。耳缘打孔是标记断奶后及成年小鼠的首选方法，且无需麻醉；但需等耳廓完全发育（多数品系约 14 日龄）后再用于取样，并避开靠近头部血管丰富处。需要注意的是，耳洞或缺口存在愈合可能，同笼打斗也可能撕裂耳缘，应定期核对；打孔器须在笼间消毒，避免 DNA 残留。
耳标法与纹身标识法
耳标法：用专用施打器将带编号的金属耳标固定在耳廓上。因耳标体积相对较大、而小鼠耳廓发育很快，耳标仅适用于断奶后及成年小鼠；耳标可能造成不适，有时会脱落或被撕裂，发现后应及时补打。
纹身标识法：用专用仪器在趾、尾或耳部打上编号，通常无需麻醉即可产生固定且可长期保存的 ID，可同时用于新生鼠、断奶后及成年鼠。
染色法
用毛笔或棉签蘸取化学药品，在体表不同部位涂上斑点以示不同编号，适用于数量少、实验周期短的场景。常用染液有 3%–5% 苦味酸（黄色）、0.5% 中性品红（红色）、2% 硝酸银（咖啡色）。
需注意！色素类标记一般只能维持 1–2 周，为避免褪色，每隔2～3周可重染一次；且只适用于白化及浅色小鼠，深色毛鼠无法辨认。若用记号笔直接标耳或尾，仅能维持 1–2 天。
Q2: 笼卡到底该写什么？
笼卡不是写个品系名就行。规范做法是按用途分成饲养笼笼卡和繁殖笼笼卡两张，因为两者要回答的问题不同：饲养笼回答"这笼是什么小鼠"，繁殖笼还要回答"小鼠繁殖信息"。
饲养笼笼卡：品系名称、亲代编号、代次信息、出生日期、性别与数量、个体编号、个体基因型等。
繁殖笼笼卡：品系名称、双亲号码、合笼或见栓日期、出生日期、产仔数、断乳日期、断乳小鼠性别与数量等。
两张卡都应留出负责人、使用单位/部门、IACUC 编号、笼位位置的位置——出了问题要能确定人和项目。
Q3:小鼠多大可以合笼？一雄配几雌？
鼠龄：雌鼠性成熟约在 4–8 周龄，雄鼠性成熟约在 6–8 周；一般 6–8 周龄即可配种。
注意超过 15 周从未配过种的雌鼠交配可靠性明显下降，不建议使用。雄鼠方面，更推荐直接使用 3–4 月龄、已有配种经验的雄鼠，而非年轻无经验雄鼠。同样，条件允许时优先选用有生育史的雌鼠。
挑鼠：配繁前应检查种鼠状态——被毛紧披有光泽、肥瘦适中、四肢有力、反应敏捷、眼鼻无分泌物、天然孔腔干净、粪便呈麦粒状。雌鼠还要检查是否有阴道隔，雄鼠检查生殖器是否缺失。
一雄配几雌：推荐两种组合——单配（1 雌 1 雄）与双雌配（1 雄 2 雌），因为雄鼠每日精子产能有限，所以每只雄鼠适合配 2 只雌鼠。单配便于谱系记录，双雌配中母鼠可互相帮忙抚养幼鼠且能加快繁殖速度。
雄鼠建议提前单放 1–2 周再放雌鼠；若使用连续交配的雄鼠，隔离至少 1 周可最大程度提高其生育力。另需知道，精子量恢复速度存在品系差异，多数品系约 2 天，而部分品系如 C57BL/6 可能需 4 天。
检栓查的是阴道栓，它是雄鼠精液、雌鼠阴道分泌物与阴道脱落上皮细胞混合后形成的，作用是防止精液倒流、提高受孕率。阴道栓多为白色或淡黄色，外形像一粒蜡质的米粒。
时间窗口很重要！阴道栓在交配后即形成，一般在 8–24 小时内（多数 12–24 小时）自动脱落。因此必须次晨尽早检查——尤其 C57BL/6 等品系的栓较薄、溶解速度快，迟检容易漏检。
见栓后：记录见栓日期。通常见栓当天记为妊娠第 1 天，对应胚胎日 E0.5（dpc 0.5）。
Q5:见栓就等于怀孕吗？接下来要做什么？
不等于。
见栓不等于一定怀孕：见栓只说明发生了交配。还有一点值得知道：BALB/cJ 等品系的雄鼠会与非发情期雌鼠交配，这也是"见栓却未孕"的常见原因。
不见栓不等于一定没怀孕：栓可能在检查前已经脱落（尤其 C57BL/6），交配也可能发生在非观察时段。
怎么确认：小鼠不建议用触诊法（胎儿过小，触诊既不可靠，也可能损伤胚胎）；可靠的做法是观察腹部是否膨隆——远交系（如 CD-1）约在妊娠第 13 天可见，近交系约在第 14 天可见。妊娠期一般为 19–21 天，可据此倒推生产日期。确认妊娠后转入单独饲养。
孕鼠管理，几条最实用的：
- 产前产后各一周是敏感期，应尽量减少打扰、放在安静环境；其中产前 3 天与产后 3 天避免换笼，保证饲料、饮水充足；
- 笼内提供柔软的筑巢材料（刨花、棉絮、纸巾、软木絮），尽量不更换垫料，以免破坏母鼠熟悉的气味；
- 孕鼠临产时不要从笼中取出交配雄鼠，也不要在仔鼠断奶前把雄鼠放回繁殖笼——移除雄鼠本身就可能导致雌鼠焦虑，进而弃养甚至食仔；
- 减少噪音、振动和气味干扰。母鼠受到外界打扰可能出现应激反应，表现为早产、难产、食仔；
- 需要补充营养时，可适当添加少量瓜子、坚果、蛋黄等；
- 如实验必须操作新生鼠，操作完成后可用笼盒内的脏垫料涂擦仔鼠全身，遮盖陌生气味，降低被母鼠弃养的风险。
本期五个问题涵盖一只小鼠从登记编号、配对合笼到确认怀孕的这条手工繁育的几个方面。这条链路上最消耗精力的，往往不是技术本身，而是重复劳动和等待：等小鼠生长、合笼配繁、获取足够数量的同周龄子代用于实验，这往往需要大量的精力和成本的投入。
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上海南方模式生物科技股份有限公司（Shanghai Model Organisms Center, Inc.，简称"南模生物"），成立于2000年9月，是一家上交所科创板上市高科技生物公司（股票代码：688265），始终以编辑基因、解码生命为己任，专注于模式生物领域，打造了以基因修饰动物模型研发为核心，涵盖多物种模型构建、饲养繁育、表型分析、药物临床前评价等多个技术平台，致力于为全球高校、科研院所、制药企业等客户提供全方位、一体化的基因修饰动物模型产品解决方案。
