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Luminex液相芯片技术的原理、工作流程与微量样本检测应用

浏览次数:51 发布日期:2026-8-20  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
简述
Luminex液相芯片技术是一种基于荧光编码微球和双激光流式检测的高通量蛋白定量平台,能够在单个样本孔中同时完成多达100种分析物的检测。该技术凭借其微量样本消耗、宽动态检测范围和高通量多重分析能力,在生物标志物筛选、细胞因子谱分析和药物药效学评估等领域展现出显著优势。
 
一、技术原理与核心组件
Luminex液相芯片技术的核心在于其独特的荧光编码微球系统。每一组微球内部嵌入了不同比例的红光和红外光染料,形成具有特定光谱特征的编码"标签"。根据染料配比的不同,目前可生成多达100种颜色各异的微球群体。每种微球表面共价偶联有针对特定目标分析物(如某种细胞因子或生长因子)的捕获抗体,构成了"一球一靶"的对应关系。
 
在反应体系中,这些不同编码的微球被混合后与样本共同孵育,使微球表面的捕获抗体与样本中的目标分子特异性结合。随后,加入生物素标记的检测抗体,形成"捕获抗体-目标蛋白-检测抗体"的夹心复合物。最后通过藻红蛋白(PE)标记的链霉亲和素与生物素结合,完成荧光信号的放大标记。

二、检测工作流程的分步解析
(一)抗原捕获与夹心复合物形成
实验开始后,预先包被了特异性抗体的微球与待测样本共同孵育。在此阶段,样本中游离的细胞因子、趋化因子等靶蛋白会与微球表面相应的捕获抗体结合。经过充分洗涤去除未结合物质后,加入生物素化的检测抗体进行第二步孵育。该抗体识别靶蛋白的另一抗原表位,形成完整的免疫夹心结构。
(二)信号报告系统
随后加入PE标记的链霉亲和素,后者与生物素检测抗体高效结合,在微球表面引入PE荧光信号。反应体系中各微球携带的PE荧光强度与对应靶蛋白的结合量呈正比,从而实现定量检测。

三、仪器读取与信号解析
Luminex技术的信号读取依赖双激光流式检测系统,目前主要分为两类平台。
(一)Luminex®100/200双激光流式平台
该平台以流式方式驱动微球单个排列通过检测区。第一束激光(通常是635nm红色激光)激发微球内部的红光/红外光染料,通过解析荧光比例来判断该微球的分类编码,从而确定其对应的分析物种类。第二束激光(532nm绿色激光)激发微球表面的PE荧光信号,其强度与目标分析物的结合量直接相关。两束激光的数据被同步采集,实现对"定性"(检测哪种分析物)和"定量"(浓度高低)的同步分析。
(二)MAGPIX®磁珠成像平台
MAGPIX系统采用磁珠和成像检测模式。反应中使用磁珠而非聚苯乙烯微球,可通过磁场将微球单层吸附于检测板底部,便于清洗和成像。系统利用两个发光二极管(LED)进行照明:一个用于识别微球分类编码,另一个用于检测PE信号强度。每个孔的图像由CCD相机捕获,与流式模式相比,该系统不依赖鞘液流体驱动,设备体积更小、维护成本更低,适合常规实验室使用。

四、技术核心优势
(一)微量样本的高效利用
Luminex技术仅需25-50 μL样本即可同时完成数十至上百个靶标的定量分析。这一特点使其尤其适用于珍贵样本(如脑脊液、眼内液、肿瘤间质液、穿刺活检组织上清)及小体积动物模型样本的检测。
(二)高通量与多指标同步检测
基于96孔板格式和多重检测能力,单次实验可同时处理多个样本并获取每个样本中多达100种蛋白分子的定量数据,大幅提升实验通量和数据产出密度,尤其适合生物标志物筛选及多因子关联分析。
(三)宽动态检测范围与灵敏度
Luminex平台的有效检测范围通常覆盖3-5个数量级,可同时检测高丰度炎症因子与低丰度细胞因子(灵敏度可达pg/mL级别),避免样本稀释或重复检测。
(四)灵活兼容多种验证平台
Luminex的微球格式可与MSD电化学发光平台、ELISA、流式细胞术及单细胞测序等形成互补验证体系,有助于构建完整的多维度分子证据链。
 

五、Luminex液相芯片检测服务哪个公司有?
乐备实可承接Luminex液相芯片检测及配套多因子分析服务,依托可提供人、小鼠、大鼠等多物种多种预混检测panel(涵盖炎症、代谢、血管生成、神经科学等方向)的技术平台,结合标准化的样本前处理、数据采集及质控流程,能够开展血清、血浆、组织上清、细胞培养上清等样本中多种因子同步定量检测、多指标关联分析及药物药效评估等研究工作,为疾病机制研究、药物筛选及生物标志物发现提供高效、可靠的数据基础。
货号 产品名称 指标

LXLBH10-1

人炎症-10因子检测服务

IL-1 β/IL-1F2,IL-2,IL-4,IL-6 ,IL-8/CXCL8,IL-10,IL-12 p70,IL-13,TNF-α,IFN-γ

LXLBH27-1

人细胞因子-27因子检测服务

G-CSF,GM-CSF,IFN-γ,IL-10,IL-12(p70),IL-13,IL-17A,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8/CXCL8,MCP-1/CCL2,MIP-1β,TNF-α,IL-1Rα,IL-9,IL-15,FGF-basic,Eotaxin/CCL11,IP-10/CXCL10,MIP-1α/CCL3,PDGF-BB,RANTES,VEGF-A

LXLTH18-3 人神经退行性疾病-18因子检测服务 MIF,CNTF,FGF-21,BDNF,Tau (Total),Tau (pT181),GDNF,GFAP,NF-H,S100B,TDP-43,Amyloid beta 1-42,YKL-40 (CHI3L1),Kallikrein-6 (KLK6),NCAM-1,Neurogranin (NRGN),NGF beta,UCHL1

LXLTM36-1

小鼠细胞因子/趋化因子-36因子检测服务

GM-CSF,IFN gamma,IL-1 beta,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-12p70,IL-13,IL-18,TNF alpha,IL-9,IL-10,IL-17A (CTLA-8),IL-22,IL-23,IL-27,G-CSF (CSF-3),IFN alpha,IL-3,IL-15/IL-15R,IL-28,IL-31,IL-1 alpha,LIF,ENA-78 (CXCL5),M-CSF,Eotaxin (CCL11),GRO alpha (CXCL1),IP-10 (CXCL10),MCP-1 (CCL2),MCP-3 (CCL7),MIP-1 alpha (CCL3),MIP-1 beta (CCL4),MIP-2,RANTES (CCL5)

LXLBH48-1 

人细胞因子-48因子检测服务

β-NGF,CTACK/CCL27,Eotaxin/CCL11,FGF-basic,G-CSF,GM-CSF,GRO-α (Gro-a/KC/CXCL1),HGF,IFN-α2,IFN-γ,IL-1α,IL-1Rα,IL-2Rα,IL-1β,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8/CXCL8,IL-9,IL-10,IL-12(p40),IL-12(p70),IL-13,IL-15,IL-16,IL-17A,IL-18,IP-10/CXCL10,LIF,M-CSF,MCP-1/CCL2,MCP-3/CCL7,MIG,MIP-1α/CCL3,MIP-1β,MIF,PDGF-BB,RANTES,SCF,SCGF-β,SDF-1α,TRAIL,TNF-α,TNF-β,VEGF-A

 
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发布者:上海乐备实生物技术有限公司
联系电话:4001619919
E-mail:labex-mkt@u-labex.com

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