小鼠组织髓系细胞中巨噬细胞极化亚群的特性研究
生物学背景
巨噬细胞（Macrophage）是髓系免疫细胞的核心组成部分，由骨髓来源单核细胞分化成熟，广泛定居于全身各类组织器官、循环血液及腹腔液中，是机体固有免疫应答、组织损伤修复与炎症稳态平衡的关键细胞成分。根据活化后的功能表型，巨噬细胞可分为两大功能亚群：促炎 M1 型巨噬细胞与抗炎修复 M2 型巨噬细胞。不同亚群细胞表面表达特征标志物、分泌细胞因子谱存在明显差异，为研究巨噬细胞的功能异质性、炎症调控及组织重塑相关生物学特性提供了有价值的线索。
实验信息
配色方案
逻辑设门图&数据结果说明
圈门逻辑
数据结果
Mouse MacroPhage Panel Kit 肝脏组织验证数据
使用 7色的多色方案对小鼠组织髓系细胞中巨噬细胞极化亚群进行特性研究。
来自小鼠组织(肝脏，肺脏，腹腔）单细胞悬液进行代表性分析。首先通过 FSC-A 和 SSC-A 圈取主要细胞群，然后根据光散射特性去黏连得到单细胞。通过 Fixable Viability Dye 545 活死染料圈出活细胞，在活细胞门内，通过 CD45⁺鉴定全部免疫细胞；于 CD45⁺免疫细胞中以 CD11b⁺筛选髓系细胞，并剔除 Ly6G⁺中性粒细胞干扰群，再通过 F4/80⁺界定巨噬细胞群体；最后通过 CD86/CD206 双参数识别 M1 促炎巨噬细胞（CD86⁺）和 M2 修复巨噬细胞（CD206⁺）。在 3 激光15色Attune nxt流式细胞仪上采集样本。使用 Flowjo v10 软件进行数据分析。
巨噬细胞（Macrophage）是髓系免疫细胞的核心组成部分，由骨髓来源单核细胞分化成熟，广泛定居于全身各类组织器官、循环血液及腹腔液中，是机体固有免疫应答、组织损伤修复与炎症稳态平衡的关键细胞成分。根据活化后的功能表型，巨噬细胞可分为两大功能亚群：促炎 M1 型巨噬细胞与抗炎修复 M2 型巨噬细胞。不同亚群细胞表面表达特征标志物、分泌细胞因子谱存在明显差异，为研究巨噬细胞的功能异质性、炎症调控及组织重塑相关生物学特性提供了有价值的线索。
实验信息
|
样本类型 |
Mouse liver,lung,peritoneal cavity |
|
方案类型 |
Multicolor panel |
|
实验方案 |
surface marker staining |
|
使用仪器 |
Attune NXT Flow Cytometer |
|
细胞亚群 |
MacroPhage/M1/M2 |
配色方案
|
指标 |
荧光素 |
克隆号 |
货号 |
指标意义 |
|
CD45 |
APC-Cy7 |
30-F11 |
S0N0001 |
白细胞 |
|
CD11b |
PerCP-Cy5.5 |
M1/70 |
S0N0001 |
髓系细胞 |
|
F4/80 |
PE |
S-R537 |
S0N0001 |
小鼠巨噬细胞 |
|
CD86 |
AF488 |
GL-1 |
S0N0001 |
M1 促炎型巨噬 |
|
CD206 |
AF647 |
S-R498 |
S0N0001 |
M2 修复型巨噬 |
|
Ly6G |
AF700 |
1A8 |
S0N0001 |
中性粒标记 |
|
活死染料 |
BV510 |
/ |
S0B88802 |
区分死活细胞 |
圈门逻辑
数据结果
Mouse MacroPhage Panel Kit 肝脏组织验证数据
Mouse MacroPhage Panel Kit 肺脏验证数据
Mouse MacroPhage Panel Kit 腹腔巨噬验证数据
使用 7色的多色方案对小鼠组织髓系细胞中巨噬细胞极化亚群进行特性研究。
来自小鼠组织(肝脏，肺脏，腹腔）单细胞悬液进行代表性分析。首先通过 FSC-A 和 SSC-A 圈取主要细胞群，然后根据光散射特性去黏连得到单细胞。通过 Fixable Viability Dye 545 活死染料圈出活细胞，在活细胞门内，通过 CD45⁺鉴定全部免疫细胞；于 CD45⁺免疫细胞中以 CD11b⁺筛选髓系细胞，并剔除 Ly6G⁺中性粒细胞干扰群，再通过 F4/80⁺界定巨噬细胞群体；最后通过 CD86/CD206 双参数识别 M1 促炎巨噬细胞（CD86⁺）和 M2 修复巨噬细胞（CD206⁺）。在 3 激光15色Attune nxt流式细胞仪上采集样本。使用 Flowjo v10 软件进行数据分析。
标签：
巨噬细胞
