红色荧光蛋白标记试剂盒使用说明书

一. 试剂盒说明
mCherry是一种来自于蘑菇珊瑚（mushroom coral）的红色荧光蛋白，常有于标记和示踪某些分子和细胞组分。相对于其他荧光，mCherry的好处在于它的颜色和应用最多的绿色荧光蛋白（GFP）能进行共同标记，并且mCherry相对于其他单体荧光蛋白来说也具有卓越的光稳定型。本产品将红色荧光蛋白的基因插入慢病毒介导的载体中，通过flap-Ub 启动子过表达从而作为报告基因，在细胞中表达。常用于细胞标记后移植追踪，从而评估移植后细胞的归巢以及治疗效果等。

二.试剂盒组份 

三. 注意事项
红色荧光标记液避免反复冻融，操作时要戴手套和口罩。该产品仅限于非临床性科研使用。

四. 操作步骤
细胞传代培养到6孔板或者6cm盘中12-16小时后，将红色荧光蛋白标记液0.3ml（6孔板一个孔中）或者0.5 ml（6cm盘）分别与新鲜细胞培养液混匀，比例为0.3ml红色荧光蛋白标记液中加入0.7ml新鲜培养液和1.0 μl polybrene（终浓度8ng/ml），0.5ml红色荧光蛋白标记液中加入1.5ml新鲜培养液和2 μl polybrean（终浓度8ng/ml）。预混好的红色荧光蛋白标记液加入到目的细胞培养皿中，此时细胞密度不宜超过60%。2个小时之内每间隔15-30min轻轻晃动被标记的细胞培养皿，可以达到更好的标记效果，2小时之后培养皿中补充等体积的新鲜培养液，过夜培养后更换成新鲜培养液。48小时之后，在荧光显微镜下观察标记红色荧光效率。