VSV-G同源性G蛋白序列作为In vivo CAR-T递送包膜的效率及特异性

文章来源公众号：IMMUNO随笔                 作者：免疫背包客

GigaMune公司通过生物信息学手段搜索比对到了166个与VSV-G具有同源性的G蛋白序列，随意从中挑选了9种序列作为慢病毒载体的包膜蛋白，并测试不同包膜递送载体的效率、特异性和对不同靶细胞的敏感性。

166个G蛋白在氨基酸上与VSV-G同源性介于17.3% ~ 99.4%之间，平均57.5%，中位数49.1%。而随意挑选的9种序列与VSV-G的同源性介于26%-85%之间。

值得注意的是，只有同源性为85%的候选I序列保留了H8, K47, R354三个氨基酸，这三个氨基酸是VSV-G与LDL-R结合所必须的，突变后丧失与LDL-R的结合，这也是目前in vivo CAR-T开发经常采用的突变方式。

有趣的是，尽管相似性甚至低至26%，但是结构与VSV-G具有极高的相似性。

体外初步研究发现不同包膜蛋白的转染效率是不同的，以CD3靶向性为例，相比于候选A和B，候选C对T细胞具有较高的转染效率。

整体的转染效率、敏感性和特异性pattern如下：

利用候选C包膜和CD3靶向性制备的CAR递送系统在小鼠体内可以很好的生成CAR-T并杀伤肿瘤。

该研究为递送载体的包膜选择提供了更多的替代策略，例如一旦人体对初次治疗的VSV-G递送系统产生抗药性，基于VSV-G低相似性的包膜蛋白可能提供二次治疗机会。​