RAYPA培养基自动制备应用案例：生活饮用水大肠埃希氏菌检测

方案摘要：通过自动化精准控制培养基的特异性成分、灭菌条件和分装精度，结合酶底物荧光技术或选择性培养原理，实现从 “样本接种 - 培养 - 结果判读” 的全流程标准化。其核心价值在于利用设备的技术优势，突破传统手工操作的误差瓶颈，为饮用水中埃希氏菌的快速、准确检测提供可靠支撑，助力保障饮用水微生物安全。
 
方案详情：
实验原理基于总大肠菌群多管发酵法，当初发酵培养物呈阳性时，取菌液接种于含 β- 葡萄糖醛酸酶特异性荧光底物的培养基。由于大肠埃希氏菌可分泌β- 葡萄糖醛酸酶，该酶能催化荧光底物发生水解反应，生成具荧光活性的产物。通过紫外激发荧光检测技术，观察培养物是否产生特征性荧光，从而实现对水中大肠埃希氏菌的定性检测。此方法利用目标菌的酶活性差异，将总大肠菌群的初筛与埃希氏菌的特异性鉴别相结合。
 
二、实验准备
1、培养基和试剂
① EC-MUG培养基
 
2、仪器与设备
① 紫外灯：6W，波长为366nm。
② 培养箱。
③ 电子天平。
④ 平皿：直径9CM。
⑤ 无菌试管：约15MM×160MM。
⑥ 锥形瓶：1000ML。
⑦ 小倒管。
⑧ 接种环。
⑨ RAYPA培养基自动制备分装仪。
 
三、实验步骤
1、接种：使用RAYPA培养基自动制备分装仪，通过自动制备、高压灭菌及自动分装功能，将EC-MUG培养基分装至试管中，然后用无菌接种环货无菌棉签将总大肠菌群多管发酵法在初发酵时产酸产气的试管中液体接种到EC-MUG管中。实验室生物安全要求应依据GB 19489。
 
2、培养：将已接种的EC-MUG管在培养箱中44.5℃±0.5℃培养24h±2h。
实验数据处理    将培养后的EC-MUG管在暗处用紫外灯照射，如果有蓝色荧光产生则表示水样中含有大肠埃希氏菌。
   计算EC-MUG阳性的管数，查对应的MPN表得出大肠埃希氏菌的MPN值，结果以MPN/100ML报告。