细胞培养全流程中使用的消化液、培养基、细胞因子及作用介绍

号外号外！细胞培养全流程的《好东西》震撼登场啦！

近期热映的电影《好东西》，无疑是院线中最为璀璨的一颗明星。提及 “好东西”，作为生物体基本结构和功能单位的明星--细胞，在其体外培养的全流程中自然也应当拥有最为优质的资源。那么，接下来就让我们一同来看看细胞培养全流程中究竟都需要哪些产品吧！

Part1细胞消化液

• 胰蛋白酶：胰蛋白酶是一种胰腺丝氨酸蛋白酶，对碱性氨基酸、精氨酸和赖氨酸的羧基参与的肽键具有特异性。它能使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸，主要是动物胰脏合成的胰蛋白酶原前体在肠道中受肠激酶活化而产生，商业用胰蛋白酶多是重组大肠杆菌表达生产的。胰蛋白酶适用于消化细胞间质较少的软组织，但对纤维组织和硬癌组织效果差。在组织解离的时候，纯化的胰蛋白酶需要与其它酶如胶原酶联合使用。
• Accutase 消化液：是一种非动物源性的细胞消化酶，成分包含多种蛋白酶和其他酶类。它通过水解细胞间和细胞与培养器皿表面的多种蛋白质成分来分离细胞，其作用机制相对复杂，能够在不损伤细胞表面抗原和细胞活力的情况下有效地消化细胞。
• 胶原酶：胶原酶主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。目前商用胶原酶是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的，分为 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ 等不同类型，要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。胶原酶对胶原的消化作用很强，仅对细胞间质有消化作用而对细胞损害不大，适于消化分离纤维性组织、上皮和较硬的癌组织。钙镁离子和血清不会对胶原酶的活性及消化作用产生影响。

Part2细胞培养基

• RPMI-1640 Medium：广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，主要用于悬浮细胞培养。
• Minimum Essential Medium（MEM）也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
• DMEM-高糖：可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
• DMEM-低糖：可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
• DMEM/F12：适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DMEM/F12 medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
• Ham’s F-12培养基：可以在加入很少血清的情况下应用，特别适合单细胞培养和克隆化培养，是无血清培养中常用的基础培养液。

Part3细胞因子

细胞因子由免疫细胞经刺激而合成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质。不同细胞培养所需细胞因子也不完全相同，根据不同细胞特性，选择最适宜细胞因子才能促进细胞扩增达到最佳。

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