活细胞成像应用于细菌感染研究
感染是直接创伤幸存者发病和死亡的最常见原因，观察到的感染率远远超过预期。此外，所有形式的手术和许多非手术的条件都会损伤组织。然而，连接组织损伤和感染的机制尚不明确[1]。
中性粒细胞是人类先天免疫系统中数量最多的白细胞，它们在循环中代表着对侵入病原体的细胞防御的第一道防线。中性粒细胞是第一批被招募到感染和炎症部位的细胞，它们部署了强大的机制来消灭病原体。中性粒细胞对抗细菌和真菌病原体是先天免疫系统的重要组成部分，并参与炎症反应的发展。
中性粒细胞在遇到危险信号时，会根据受体和蛋白质含量作出反应，通过吞噬、细胞外陷阱等方式摧毁入侵微生物。其核心作用是吞噬，将微生物与溶酶体融合，产生吞噬溶酶体，在受控条件下杀死并降解病原体。
pHrodo™染料是一种新型荧光染料，当其周围环境pH值降低时，它会显著增强荧光亮度，因此可以使用pHrodo染料特异性检测和观测吞噬与内吞作用。因此将金黄色葡萄球菌标记pHrodo可用于鉴定中性粒细胞的细菌杀伤作用。
杀伤作用是一个连续的过程，那么如何保证我们可以完整的记录到这一情况的发生呢？我们可以使用活细胞成像系统来对其杀伤作用进行延时记录。Celloger®全自活细胞成像系列配备了最先进的荧光/明场显微镜、自动聚焦和实时多位点成像技术，可以获得最佳图像以及视频记录，各种基于细胞的研究工作和应用都可以用这个全方位的系统来完成。该成像设备使用全自动镜头可以分别在X/Y轴移动117mm x 77mm，可以根据实验人员的设置（时间间隔、周期、总时长）在移动范围里获取多个位点的图像。
图1 Celloger系列产品线
应用实例：
使用pHrodo Green金黄色葡萄球菌生物制品和Celloger Mini Plus仪器(Curosis)评估杀伤效果。实验结果如下图所示：
图2 VAL和PAR可挽救DAMP抑制的PMN吞噬和杀伤（标尺= 100 μm）
小鼠PMN中pHrodo绿色金黄色葡萄球菌生物颗粒的摄取显示了人和小鼠系统的相似性。在这里，酸化吞噬体的吞噬作用被mtDNA明显抑制，但通过VAL + PAR后处理恢复。研究结果表明，mtDNA会抑制PMN的功能，VAL+PAR可用于挽救被mtDNA抑制的PMN功能。
结论：
对荧光强度的定量分析亦可以使用我们配套的软件。Celloger®系列可以放置在普通细胞培养箱中，并且可以承受自生热量，从而实现长期成像。通过优化荧光滤光片和光路，可以用最小的光强实时获得清晰的活细胞明场图像以及荧光图像。此外，Celloger®兼容多种类型的培养容器，位置重现性高，多点成像时扫描性能稳定。因此，Celloger®将为您的研究带来可靠的结果。
[1] Kim HI, Park J, Gallo D, Shankar S, Konecna B, Han Y, Banner-Goodspeed V, Capers KR, Ko SG, Otterbein LE, Itagaki K, Hauser CJ. DANGER Signals Activate G -Protein Receptor Kinases Suppressing Neutrophil Function and Predisposing to Infection After Tissue Trauma. Ann Surg. 2023 Dec 1;278(6):e1277-e1288.
中性粒细胞是人类先天免疫系统中数量最多的白细胞，它们在循环中代表着对侵入病原体的细胞防御的第一道防线。中性粒细胞是第一批被招募到感染和炎症部位的细胞，它们部署了强大的机制来消灭病原体。中性粒细胞对抗细菌和真菌病原体是先天免疫系统的重要组成部分，并参与炎症反应的发展。
中性粒细胞在遇到危险信号时，会根据受体和蛋白质含量作出反应，通过吞噬、细胞外陷阱等方式摧毁入侵微生物。其核心作用是吞噬，将微生物与溶酶体融合，产生吞噬溶酶体，在受控条件下杀死并降解病原体。
pHrodo™染料是一种新型荧光染料，当其周围环境pH值降低时，它会显著增强荧光亮度，因此可以使用pHrodo染料特异性检测和观测吞噬与内吞作用。因此将金黄色葡萄球菌标记pHrodo可用于鉴定中性粒细胞的细菌杀伤作用。
杀伤作用是一个连续的过程，那么如何保证我们可以完整的记录到这一情况的发生呢？我们可以使用活细胞成像系统来对其杀伤作用进行延时记录。Celloger®全自活细胞成像系列配备了最先进的荧光/明场显微镜、自动聚焦和实时多位点成像技术，可以获得最佳图像以及视频记录，各种基于细胞的研究工作和应用都可以用这个全方位的系统来完成。该成像设备使用全自动镜头可以分别在X/Y轴移动117mm x 77mm，可以根据实验人员的设置（时间间隔、周期、总时长）在移动范围里获取多个位点的图像。
图1 Celloger系列产品线
应用实例：
使用pHrodo Green金黄色葡萄球菌生物制品和Celloger Mini Plus仪器(Curosis)评估杀伤效果。实验结果如下图所示：
图2 VAL和PAR可挽救DAMP抑制的PMN吞噬和杀伤（标尺= 100 μm）
小鼠PMN中pHrodo绿色金黄色葡萄球菌生物颗粒的摄取显示了人和小鼠系统的相似性。在这里，酸化吞噬体的吞噬作用被mtDNA明显抑制，但通过VAL + PAR后处理恢复。研究结果表明，mtDNA会抑制PMN的功能，VAL+PAR可用于挽救被mtDNA抑制的PMN功能。
结论：
对荧光强度的定量分析亦可以使用我们配套的软件。Celloger®系列可以放置在普通细胞培养箱中，并且可以承受自生热量，从而实现长期成像。通过优化荧光滤光片和光路，可以用最小的光强实时获得清晰的活细胞明场图像以及荧光图像。此外，Celloger®兼容多种类型的培养容器，位置重现性高，多点成像时扫描性能稳定。因此，Celloger®将为您的研究带来可靠的结果。
[1] Kim HI, Park J, Gallo D, Shankar S, Konecna B, Han Y, Banner-Goodspeed V, Capers KR, Ko SG, Otterbein LE, Itagaki K, Hauser CJ. DANGER Signals Activate G -Protein Receptor Kinases Suppressing Neutrophil Function and Predisposing to Infection After Tissue Trauma. Ann Surg. 2023 Dec 1;278(6):e1277-e1288.
