活细胞成像设备用于细胞迁移研究
划痕实验又称伤口愈合实验，是一项常见的细胞功能实验，用于检测细胞的迁移能力。原理是当单层细胞生长到融合状态时，在融合单层细胞上人为制造一个空白区域（即划痕），之后随着培养时间的延长划痕会逐渐愈合，同时细胞增殖也参与了这一过程。
划痕实验在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程，并可根据需要对迁移过程中的活细胞进行成像，分析细胞间相互作用，而且划痕实验也是研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法[1]。因此，我们可以通过划痕实验来进行药物筛选、化合物毒性、癌症治疗等研究。
划痕实验的基本流程是“培养细胞→制造划痕→拍摄迁移图像→分析数据”。
图1 细胞划痕实验流程图
Celloger® Mini Plus是一款活细胞成像设备，可以根据用户设定的时间参数对指定的位置进行成像记录。 同时可通过使用分析软件计算捕获图像的细胞融合度（%），定量分析细胞的迁移能力。常规细胞划痕工作的全流程，从细胞培养到完成细胞实验，均可以用该系统来完成观察记录（图2）。
图2 Celloger® Mini Plus设备
应用示例：
1、使用Celloger® Mini Plus在4x物镜下，记录明场HeLa、L929、U-2OS、CHO-k细胞的迁移情况，间隔拍摄时间为30分钟，总记录时长为3天（图3）。
图3 HeLa、L929、U-2OS、CHO-k细胞的迁移情况（比例尺，200μm）
2、为了验证来自E2结合的CAFs的CD147是否单独增强了癌细胞的迁移，在实验中使用Celloger® Mini Plus记录48小时MKN1细胞的迁移情况，结果显示，si- ERα对caf# 14的处理显著降低了MKN1癌细胞的迁移，但通过添加rhCD147可以恢复癌细胞迁移能力[2]（图4）。
图4 细胞的迁移情况（比例尺，200μm）
结语：
评价划痕实验的常规方法通常为定点分析，研究者需在固定的时间（24/48/72h）将样本拿出培养箱置于显微镜下观察。使用Celloge®活细胞成像设备无需反复拿取细胞样本，在培养箱内即可实现对细胞的可视化以及进行长期动力学测定。利用延时成像技术，可以通过图像和视频来验证细胞的迁移能力，丰富研究人员的数据以及确保数据的客观准确性。
参考文献：
[1] Liang CC, Park AY, Guan JL. In vitro scratch assay: a convenient and inexpensive method for analysis of cell migration in vitro. Nat Protoc. 2007;2(2):329-33.
[2] Bae WJ, Kim S, Ahn JM, Han JH, Lee D. Estrogen-responsive cancer-associated fibroblasts promote invasive property of
gastric cancer in a paracrine manner via CD147 production. FASEB J. 2022 Nov;36(11):e22597.
划痕实验在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程，并可根据需要对迁移过程中的活细胞进行成像，分析细胞间相互作用，而且划痕实验也是研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法[1]。因此，我们可以通过划痕实验来进行药物筛选、化合物毒性、癌症治疗等研究。
划痕实验的基本流程是“培养细胞→制造划痕→拍摄迁移图像→分析数据”。
图1 细胞划痕实验流程图
Celloger® Mini Plus是一款活细胞成像设备，可以根据用户设定的时间参数对指定的位置进行成像记录。 同时可通过使用分析软件计算捕获图像的细胞融合度（%），定量分析细胞的迁移能力。常规细胞划痕工作的全流程，从细胞培养到完成细胞实验，均可以用该系统来完成观察记录（图2）。
图2 Celloger® Mini Plus设备
应用示例：
1、使用Celloger® Mini Plus在4x物镜下，记录明场HeLa、L929、U-2OS、CHO-k细胞的迁移情况，间隔拍摄时间为30分钟，总记录时长为3天（图3）。
图3 HeLa、L929、U-2OS、CHO-k细胞的迁移情况（比例尺，200μm）
2、为了验证来自E2结合的CAFs的CD147是否单独增强了癌细胞的迁移，在实验中使用Celloger® Mini Plus记录48小时MKN1细胞的迁移情况，结果显示，si- ERα对caf# 14的处理显著降低了MKN1癌细胞的迁移，但通过添加rhCD147可以恢复癌细胞迁移能力[2]（图4）。
图4 细胞的迁移情况（比例尺，200μm）
结语：
评价划痕实验的常规方法通常为定点分析，研究者需在固定的时间（24/48/72h）将样本拿出培养箱置于显微镜下观察。使用Celloge®活细胞成像设备无需反复拿取细胞样本，在培养箱内即可实现对细胞的可视化以及进行长期动力学测定。利用延时成像技术，可以通过图像和视频来验证细胞的迁移能力，丰富研究人员的数据以及确保数据的客观准确性。
参考文献：
[1] Liang CC, Park AY, Guan JL. In vitro scratch assay: a convenient and inexpensive method for analysis of cell migration in vitro. Nat Protoc. 2007;2(2):329-33.
[2] Bae WJ, Kim S, Ahn JM, Han JH, Lee D. Estrogen-responsive cancer-associated fibroblasts promote invasive property of
gastric cancer in a paracrine manner via CD147 production. FASEB J. 2022 Nov;36(11):e22597.
