超低吸附表面耗材在细胞培养过程中的应用

细胞培养是一种基本的生命科学研究技术，已成为现代生物医学研究的重要手段。细胞培养中，除了选择合适的培养试剂，搭配优化后的培养条件，还需要谨慎选择合适的培养器皿，对细胞的生长和实验结果的准确性有至关重要的影响。

NEST对细胞培养表面采用了不同的处理方式，确保不同细胞类型在培养过程中都能实现最佳的结果。
  1）用于贴壁细胞的TC处理培养表面
TC处理表示该器皿经过表面的改性处理，适合贴壁细胞的培养。NEST多数细胞培养耗材都经过TC处理，能够优化贴壁效果，提高培养效率。
  2）用于悬浮细胞的未经处理培养表面
高质量，透光良好的聚苯乙烯表面疏水，是悬浮细胞培养的理想选择，也适用于各种生化检验。使用这种表面，细胞可以在悬浮的状态下生长和聚集，适用于悬浮细胞的培养。
3）用于3D细胞培养技术的超低吸附培养表面
 超低附着表面具有一种特殊的水凝胶涂层，该涂层可抑制特异性和非特异性固化，无细胞毒性、生物学惰性、不可降解等特点，可应用于多种培养器皿。
 
3D细胞培养技术为什么需要超低吸附？
传统的2D细胞培养技术中，细胞只在接触面单侧吸附，许多细胞逐步扁平化，有的分裂异常，有的丧失分化表型。
3D细胞培养技术中细胞的整个表面都可吸附，能够建立起类似体内的的细胞-基质与细胞-细胞间相互作用，弥补传统2D培养的缺陷。
经超低吸附培养表面处理的耗材能够高效实现3D球体的形成，使细胞处于悬浮状态，避免细胞在体外平面培养表面扁平化分裂异常，解决细胞体外培养丧失其分化表型的问题。
NEST 3D培养系列产品有哪些？
1）NEST超低吸附培养板是一种具有极低的表面能的耗材，可有效减少培养过程中细胞与耗材之间的相互作用，避免细胞贴壁生长，使特殊种类细胞在培养过程中保持更好的形态和活力。
 
产品特点
★ 促进3D多细胞球体的形成
★ 将细胞保持在悬浮、未附着的状态
★ 防止干细胞附着介导的分化
★ 防止锚定依赖性细胞分裂
★ 少附着蛋白和血清蛋白与底物的结合
 
产品应用
♦ 促进3D多细胞球形成，如拟胚体和肿瘤球形成
♦ 神经生物学，神经球形成
♦ 干细胞生物学，拟胚体形成
♦ 研究淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞和其他吞噬细胞的活化和灭活机制
♦ 基于悬浮细胞的筛选
♦ 培养细胞、组织或器官碎片
♦ 肿瘤研究，多细胞球形成
 
2）GelNest™基质胶是由小鼠肿瘤组织中提取的基底膜成分制备而成，包含的主要成分有层粘连蛋白、IV型胶原蛋白硫酸肝素糖蛋白等。这些成分可以提供细胞黏附、分化和增殖所需的支持和信号，同时也可以模拟生理环境中基底膜的特性，提高细胞培养的成功率和效果。除了基底膜成分，GelNest™基质胶中还富含多种生长因子。这些生长因子可以促进细胞分化、增殖和迁移，从而进一步模拟生理环境中的细胞信号通路和互动。GelNest™基质胶具有广泛的应用前景，特别是在组织工程、细胞培养和研究等方面，可被用于类器官培养、干细胞分化、血管生成、迁移或侵袭和体内肿瘤发生等研究。
NEST超低吸附产品培养性能如何？
为验证NEST产品性能，我们将记录使用NEST超低吸附培养板进行HUVEC细胞培养及脑类器官细胞培养的实验结果。

1）HUVEC细胞培养
结论：由图可见，使用NEST超低吸附培养板培养的细胞能够很好地保持悬浮状态，与TC处理的产品相比，NEST超低吸附培养板表面上的细胞附着减少了98%。
 
2）脑类器官细胞培养
将脑类器官细胞接种于NEST超低吸附细胞培养板中，观察并记录不同阶段脑类器官细胞的生长情况。

Day 2~Day 4EB（拟胚体）的形成：将种子细胞接种至NEST超低吸附U底培养板培养至出现圆形和光滑边缘。
Day 6~Day 7
诱导分化：EB转移至NEST超低吸附培养板培养，将保持光滑且在光学观测上为半透明边缘。
Day 9~Day 10
扩增：使用GelNest™基质胶进行EB包埋，继续在NEST超低吸附培养板中培养，EB表面出芽（扩增出神经上皮细胞）。
结论：在使用NEST超低吸附培养板的培养过程中，细胞未出现贴壁而导致实验失败的情况，且维持时间长，能够成功使细胞稳定生长、分化、扩增，是一款在脑类器官培养实验中可选的优秀耗材。