内毒素检测失败的原因分析及降低失败率的操作方法

在日常的内毒素检测中，我们经常会遇到结果异常或失败, 常见为空白孔反应、标准曲线失败和CV%值超标。

今天我们来聊聊，针对以上这些，在日常的内毒素检测中，该怎么应对？
 

1. 空白孔和阴性对照的失败

空白孔反应是分析方法失败常见原因之一

● 移液过程中，避免灰尘、毛发、皮肤细胞和其他颗粒物对反应孔造成污染
● 样品准备时，移液吸头不应经过空白孔或阴性对照孔
● 制备标准品时，确保充分混匀，保证最低浓度点和空白点有浓度差
● 切勿使用可能被污染的LAL试剂水制备空白孔
● 通过使用可靠厂商的试剂耗材，进一步降低污染的可能性

 

2. 标准曲线和阳性对照的失败

这类实验的失败通常是与实验人员和移液过程相关
 

● 标准品制备过程中正确使用已校准的移液器和匹配的吸头
● 实验人员需专注于标准品、样品制备和96孔板制备过程（*非常重要）
● 添加鲎试剂时推荐使用多通道移液器降低方法变异性

 

3. “热孔”或单孔污染

在空白、阴性对照或内毒素含量较低的样品孔中，常常可能发生热孔或单孔污染。通常表现为复孔中一个较另一个相比，有明显的高内毒素信号。“热孔”确切原因尚不清楚，如果确认多次的重新测试是由于96孔板的原因，建议更换新批次的96孔板。
 

以上所提到的情况中，大多数与人工操作有关，Lonza的PyroTecTM PRO 系统是一个灵活、强大和用户友好的自动化细菌内毒素检测系统，能有效减少人工手动过程中的移液和加样错误，大大降低实验人员操作时间、提高实验效率。
 

此外，PyroTecTM PRO系统样品配置高度灵活、实验准备时间短（<10min/42样品）、操作便利等特点。