D-荧光素钾盐如何标记小鼠?用量是多少?
浏览次数:872 发布日期:2023-7-28
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1. 体外生物发光检测:用无菌纯净水对D-荧光素钾盐进行溶解,配制30mg/mL的储备溶液,分装后在-20℃避光条件下保存。在37℃恒温条件下预热处理组织培养基10-20分钟,再将处理后的培养基倒入储存液中,稀释至0.15-0.3 mg/mL的工作液浓度。之后再去除混液中的细胞培养基。等待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,恒温37℃条件下孵育5-10 min,之后再进行图像分析。
2. 活体成像分析:采用无菌的DPBS缓冲液配制成为15 mg/mL的荧光素的储存液,混匀。使用水系0.2 µm真是滤器过滤对储备液进行除菌处理,处理后可即使使用,或者在-20℃避光条件下保存。腹腔注射(i.p.):按照150 mg/kg 的荧光素/体重浓度比例进行注射;注射入体内10-15 min后(等待光信号达到最强稳定平台期)之后,再进行成像分析。