实验室细胞培养注意事项
实验室细胞培养中的“5M1E”
“5M1E”代表什么？在细胞培养中有多重要？
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人（Man）
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机器（Machine）
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材料（Material）
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方法（Method）
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测量（Measurement）
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环境（Environment）
> 人（Man）
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人是处于中心位置和主导地位，其它“机”、“料”、“法”、“环”、“测”要素离开“人”也无法运转。
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研究、生产、质量管理，以人为本，只有不断提高人的质量，才能有序推进实验结果、产品质量、组织质量、体系质量及其组合的实体质量的提高。
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只有具备良好素质、专业技能过硬的研究人员去开展相关实验研究，按照规定的程序完成研究、生产等过程，并在研究过程中减少对环境产生影响，整个实验室或细胞房才会有良性的发展。
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建立良好、高效的人员管理规章制度，人岗匹配，实验室负责人、试剂耗材管理人、仪器设备监督人、值日生等。积极做好“传、帮、带”。
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定期开展工作汇报，制定实验室紧急事件处理方案等。
| 人 | 脚 | 100-1000 个微生物/cm2 |
| 头皮 | 106个微生物/cm2 | |
| 额头 | 105个微生物/cm2 | |
| 喷嚏 | 104 – 105个微生物 | |
| 唾液 | 107个微生物/mL | |
| 无菌服 | 6小时后 | 1 – 6个微生物/cm2 |
| 空气 | 户外 | 100 – 500个微生物/m3 |
| 室内 | 500 – 2000个微生物/m3 |
细胞房内，人是最大的“污染源”
预防贴士：进入细胞房正确的穿衣顺序：
- 换专用鞋（拖鞋，定期清洁）
- 无尘手套（避免不洁的双手经穿着时粘附于无尘衣上）
- 网帽/口罩（戴网帽时须确保头发不可暴露于网帽外，之后戴口罩遮住口鼻）
- 无尘服（不要穿棉质衣服，容易脱落纤维）
- 鞋套
> 机器（Machine）
使用
- 每个仪器设备建立规范的操作程序，并做好使用记录；
- 细胞房内区域设置合理，定期清洁，比如生物安全柜、培养箱、显微镜、冰箱等要经常清洁。
- 按照规定程序对仪器进行状态及性能的确认，及早发现异常；
- 仪器出现异常要及时上报，并做好警示提醒，防止进一步的破坏。
- 精密仪器、使用频率高的仪器需要按照既定时间与程序进行检修、保养；
- 一旦细胞房发生微生物污染，使用消毒液清洁仪器表面，水盘、水浴锅添加杀菌试剂。
> 材料（Material）
材料指实验室中所有实验相关的试剂、耗材、组织细胞、实验动物等。按照产品说明进行分类正确储存，并设置采购、仓库管理人，购买正品，准确做好管理工作。
培养试剂
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按照产品说明正确保存、使用；
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开封后的试剂及时使用，部分产品避免反复冻融与质量下降；
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污染的培养试剂经消毒后再处理，不要直接倒入水池。
耗材
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购买细胞培养级别，正确储存、使用；
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重复使用的耗材要注意清洁、灭菌完全以及效果测试；
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污染的耗材要及时清理出细胞房。
> 方法（Method）
方法指实验室中涉及到细胞相关实验所遵循的标准程序或方法。不管是新人或老练的人员，均需要按照程序/方法进行实验研究，不断优化实验室细胞培养SOP。
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掌握细胞培养基础知识，熟悉实验室基本流程
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观摩、练习细胞培养操作，复苏、传代、观察、冻存 ，准确做好实验记录
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自主设计试验方案熟悉更多细胞相关实验操作，实验结果可重复
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准确操作各类细胞相关实验，制定合乎实验室相关SOP
> 测量（Measurement）
测量指实验过程中保证实验结果质量所涉及的试剂配制、溶液计量、仪器精密性与性能的测量。配置专门测量人员，保准公共试剂、公共仪器使用的准确度与精确性。
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按照正确流程配制试剂，调节pH、渗透压，过滤，高压灭菌等；
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公共试剂正确配制、保存、分装使用；精密、使用频率高仪器做好准确校准与计量，保证实验准确性，做好记录与数据分析；
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定期对计量、校准的仪器进行保养、检修，保证其它测量工作的有序开展。
> 环境（Environment）
环境指实验室系统的整体环境与实验操作环境以及不同实验操作之间衔接的环节。环境是保证实验结果质量可控的前提，环节是每个步骤、程序衔接的重要控制点。
整体环境
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不同洁净级别的细胞房，环境标准会不同，各个区域设置合理；
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发生大规模污染，根据实际条件，进行全面消毒、清洁；
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定期做好清洁工作，定期更换消毒液。
操作环境
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生物安全柜/超净台等操作环境均要符合细胞培养的无菌环境；
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发生污染时，实验台面、培养箱、离心机显微镜台面等操作环境要准确消毒、清洁。
保存环境
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确保试剂、耗材等材料的保存条件正确；
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污染试剂发生泄漏时，及时清洁保存环境，避免交叉污染；
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定期清理过期产品、长期不用产品等。
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