七氟醚通过调节G9a表达缓解缺氧缺血性脑病研究•PC-12(高分化)细胞
《Bioengineered》IF：3.269
The mechanism of sevoflurane post-treatment alleviating hypoxic-ischemic encephalopathy by affecting histone methyltransferase G9a in rats
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今天我们来看看，一篇关于缺氧缺血性脑病研究的文献...
首先什么是缺氧缺血性脑病呢？
缺氧缺血性脑病（Hypoxic ischemic encephalopathy ,HIE）是足月新生儿发病和死亡的重要原因，主要导致神经元和大脑白质损伤可能的进一步影响婴幼儿神经系统发育、认知障碍甚至导致死亡。目前医学上主要采取什么方法治疗这种可怕的疾病呢？
低温疗法是唯一被正式认可的HIE治疗建议，但其对阻止神经系统损伤作用有限，所以一旦出现HIE确实很棘手。没有其他方法可以治疗吗？
根据以往报道七氟醚（sevoflurane，SF）可以减少神经系统损伤、脑梗死和神经细胞凋亡，缓解HIE，我们今天的文献就是研究七氟醚对HIE治疗效果的。PS:七氟醚是一种吸入型麻醉剂，可以镇痛还具有保护神经的效果。
下面就是我们的正题了：
据了解组蛋白甲基化是HIE的形成机制之一，其中Histone-lysine N-methyltransferase EHMT2 (G9a) and G9a-like (GLP) proteins是一个研究方向，虽然G9a在HIE中具体是如何作用的目前还不是特别清楚，但本文作者还是一眼就选择了这个方向。作者大胆猜测七氟醚是通过抑制组蛋白甲基转移酶G9a的表达，从而调节BDNF基因启动子，增加BDNF水平并参与缓解HIE。
为了验证这个猜想，作者设计了动物体内实验和体外实验两个部分。
体内实验先对SD大鼠建立HIE模型，然后对Sham组、HIE组、HIE+SF处理组、HIE+SF+AAV-G9a过表达组、HIE+SF+AAV-NC对照组进行大鼠行为学实验、脑组织HE和Nissl染色、海马区TUNEL染色，再取脑组织进行qRT-PCR、WB、ELSIA、CHIP检测相关指标。结果显示HIE组大鼠行为与Sham组有差异，大鼠表现出明显HIE症状，造模成功。检测发现HIE组大鼠G9a表达明显升高，脑组织中NGF和BDNF表达降低，神经元细胞损伤严重；而经SF处理的HIE大鼠G9a表达明显低于HIE组，NGF和BDNF表达量也较之升高，脑细胞凋亡明显低于HIE组。说明SF处理确实可以降低G9a表达，升高NGF和BDNF表达从而缓解HIE症状。
同时通过对HIE+SF+AAV-G9a过表达组、HIE+SF+AAV-NC对照组进行行为学实验、脑组织HE染色、海马区TUNEL染色结果发现G9a过表达组相较对照组明显展现出HIE症状，说明G9a确实能诱导出现HIE症状。
d：脑组织ELISA与WB检测结果，显示HIE组G9a表达量升高，BDNF与NGF表达量降低；
HIE+SF+AAV-G9a过表达组、HIE+SF+AAV-NC对照组结果类似以上HIE组与Sham组，有兴趣的同学可以参考原文。体外实验是使用PC-12细胞（Sunncell Biotechnology Inc，SNL-124）在无糖DMEM基础培养基及低氧培养箱（1%氧气）处理3h后获得缺氧（OGD）模型组。细胞分组为：sham组、OGD模型组、OGD+SF组、OGD+SF+AAV-G9a过表达组、OGD+SF+AAV-NC对照组，结果显示OGD模型组细胞G9a明显升高、BDNF降低，造模成功。OGD+SF组G9a相比OGD组降低，BDNF升高。而AAV-G9a过表达组与AAV-NC对照组相比G9a明显升高，BDNF降低。细胞体外实验展现了与动物实验相同的机制。
以下仅展示部分细胞实验结果（实验结果经重新调整，非原文描述）：
e：细胞实验显示与动物模型实验结果相同，OGD组细胞G9a表达升高，OGD+SF组表达降低，过表达G9a的细胞也明显升高；
总结：以上研究表明G9a升高可以诱导出现HIE症状，而SF可以显著缓解HIE症状，降低G9a表达水平，升高BDNF表达，减轻神经损伤，改善大鼠记忆能力。其中具体是分子机制目前还尚不清楚，需要进行大量研究。
好了今天的文献就简单解析到这，完整文献内容可以参考：
https://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/21655979.2021.1995105
文献中使用到的PC-12高分化(Sunncell Biotechnology Inc，SNL-124)细胞是来自能移植的雄性大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤， 这些细胞表达神经生长因子(NGF)受体，不合成肾上腺素，NGF可诱导产生神经表型。PC-12细胞有高分化、低分化、未分化三种，高分化与低分化细胞都是通过未分化细胞经诱导分化而来，分化程度越高越接近神经细胞表型，贴壁也会越多。本公司可以提供三种分化程度的PC-12细胞，细胞经种属鉴定正确，无污染，活性良好，欢迎官网来询。
产/品/推/荐
【SNL-124】PC-12(高分化)(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化))
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公司简介
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