单克隆抗体制备原理及步骤

单克隆抗体(monoclonal antibody)，简称单抗。与多抗相比，单抗纯度高，专一性强、重复性好、且能持续性。是针专一的抗原决定簇产生的抗体，单克隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年，由G.KÖhler和Milstein创立。主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞，生产抗体。

单克隆抗体制备的原理：
要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖，应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一，得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性，它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。

单克隆抗体制备步骤​如下：                                                  单克隆抗体制备
1、用抗原免疫小鼠；
2、从抗原免疫过的小鼠获取脾细胞；
3、应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞。这种细胞不仅能够像B淋巴细胞一样合成性质稳定的转移性抗体，而且能够像骨髓瘤细胞一样无限复制，这样就可以产生大量且性质专一的鼠源抗体；
4、对获得的杂交瘤细胞进行筛选，选出能分泌高效价抗体的杂交瘤；
5、对已筛选出的单个细胞进行鉴定和克隆。

杂交瘤产生的单克隆抗体在各个领域中应用越来越广，有很大的优点和潜力。能够根据需要进行研发生产，可建立稳定的细胞株持续供给应用，相比于抗血清能够减少大量的动物和费用，而且纯度高，均一性好，可作为一种标准试剂。