电针刺激对抑郁大鼠旷场实验及水迷宫实验中的行为影响

1.1.1实验动物

选取32只8周龄SPF级SD雄性大鼠，体重约180~220g。饲养环境：允许大鼠在恒定温度、湿度和光暗循环（20~25℃；55%±10%；7：00~19：00光照循环）下自由饮水和摄食。

1.1.2主要试剂和仪器

SDZ-ⅡB型华佗牌电子针疗仪（苏州医疗用品厂有限公司，中国），visutrack动物行为分析系统（上海欣软信息科技有限公司）；XR-XZ301 旷场实验箱，XR-XM101Morris水迷宫（上海欣软信息科技有限公司）

1.2方法

1.2.1动物分组与造模

将SD大鼠按旷场实验随机分为对照组、模型组、NLRP3阻断剂（MCC950）组、电针（EA）组，每组8只。除对照组外，其余各组皆采用孤养联合慢性不可预知性温和应激（CUMS）复制大鼠抑郁模型。应激方法包括：昼夜颠倒12h/12h、4℃冰水浴5min、禁食24h、禁水24h、夹尾1min、潮湿垫料24h、热板52℃5min，各组大鼠每天采用同1种刺激方式，每种刺激方式使用3~4次，且同种刺激不连续出现。

1.2.2干预治疗

在大鼠每天应激后1h，给予NLRP3阻断剂MCC950和电针组干预治疗。MCC950组[9]：将MCC950粉末溶解在无菌生理盐水中，制成3mg/kg的MCC950溶液，大鼠放置于固定装置中，用酒精擦拭鼠尾，使用1mL的注射器将MCC950溶液缓慢注射入侧尾静脉，给药体积为1mL/kg。电针组：参考《实验针灸学》，选择“百会”和“印堂”穴，将SD大鼠固定在鼠板上，采用华佗牌针（0.25×13mm）向后平刺4~6mm，针柄处连接华佗牌SDZ-IIB型电子针疗仪，电流输出强度1~2mA，疏密波型，刺激20min，每日1次，连续21d。对照组给予相同时间相同时长的固定。

1.2.3旷场实验

分别于造模前和治疗结束后，进行旷场实验，将大鼠放入黑色敞箱（100cm×100cm×40cm）角落，观察4min，记录各组大鼠后3min内水平运动格子数（四爪皆入记1次）和垂直竖立次数（两爪腾空放下记1次），以总运动量判断大鼠自主活动能力。

1.2.4Morris水迷宫实验

在治疗结束后，第1~4天进行定位航行实验检测大鼠学习能力，每天将大鼠从4个不同象限面向池壁放入，观察60s内大鼠爬上平台的逃避潜伏（Escapelatency，EL）。第5天进行空间探索实验检测大鼠记忆能力，移除平台后大鼠从对立象限放入，记录90s内大鼠在目标象限的空间探索时间（spaceexplorationtime，SET）。

1.3统计学分析

采用统计软件SPSS17.0进行统计分析，计量资料以平均值±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差（One-way-ANOVA）分析，不服从正态分布采用非参数检验，P<0.05为具有统计学意义。

2结果

2.1造模前后自主活动变化

旷场实验结果如图1所示，造模前各组间大鼠自主活动次数无明显差异（P>0.05）；给药后，与对照组比较，模型组大鼠活动量明显下降，电针刺激或药物干预后，大鼠的自主活动能力明显增加（P<0.05，P<0.01），有显著性差异；提示，电针可明显改善抑郁症大鼠的抑郁样行为。

2.2学习记忆能力变化

Morris水迷宫实验检测结果如图2，3所示，给药结束后前4d进行逃避潜伏期测试，第5天进行空间探索时间测试，与对照组比较，模型组大鼠逃避潜伏期明显增加，空间探索时间显著减少；与模型组比较，电针组和NLRP3阻断剂组大鼠的逃避潜伏期相对减少，空间探索时间有所增加（P<0.05，P<0.01），差异有显著性；提示，电针应激可以加强抑郁大鼠的学习记忆能力。

3 讨论

本研究采用行为学评价系统检测证实，电针刺激抑郁症大鼠的百会和印堂穴位可明显改善其抑郁样行为，以及学习记忆能力。

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