组织相容性复合体蛋白2抗体的生物素化标记实验要点

组织相容性复合体蛋白2抗体的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
克氏双糖铁琼脂
克氏双糖铁琼脂
Skirrow琼脂配套试剂
改良CCD琼脂配套试剂
Bolton肉汤配套试剂
水解酪蛋白胨（MH）琼脂
布氏肉汤
Skirrow琼脂
改良CCD琼脂基础
Bolton肉汤基础
哥伦比亚琼脂培养基
Skirrow琼脂配套试剂
改良CCD琼脂配套试剂
Bolton肉汤配套试剂
水解酪蛋白胨（MH）琼脂
布氏肉汤
Skirrow琼脂
改良CCD琼脂基础
Bolton肉汤基础
哥伦比亚琼脂培养基
Skirrow琼脂配套试剂
改良CCD琼脂配套试剂
Bolton肉汤配套试剂
水解酪蛋白胨（MH）琼脂
布氏肉汤
Skirrow琼脂
改良CCD琼脂基础
Bolton肉汤基础
哥伦比亚琼脂培养基
高氏合成1号琼脂培养基
血平板 (成品培养基)
哥伦比亚血平板(成品培养基)
改良克氏双糖培养基
硝酸盐蛋白胨水培养基
半固体琼脂