ELISA 实验结束后标曲的绘制和样本浓度核算方法

实验虽然结束，但最重要的工作还是如何把 OD 值转化为浓度，以达到分析数据的目的。

通常，推荐使用专门的曲线拟合工具绘制 ELISA 标准曲线 curve Exert1.4

点击可以直接下载 curve Exert1.4 软件 戳↓↓↓

http://www.fn-test.com/services/software-download/ for more information

1．启动「Curve Expert1.4」。

2．X 轴输入所对应的浓度值，Y 轴输入标准品的 OD 值。如图↓

3．单击 [运行]  按钮，出现如下对话框。


4．单击 [ok] 按钮，出现如下两个对话框，关闭下面一个对话框。



5. 在对话框的右上角出现一些曲线的名称，从「1」开始依次点击曲线名称，在右下角会出现相应拟合的曲线。


6. 根据拟合的曲线选取 ELISA 拟合度最佳的曲线双击，出现如下对话框。

注意：选择系数（即「r」值）最佳的曲线方程来进行运算。在上面的对话框右上角有「r」值 ，当「r」值越接近 1，拟合度越好。

7．按 [Ctrl] 键+[L] 键或者右键单击选择 [analyze]，出现如下对话框。


8． Y 轴输入对应的样本 OD 值，单击 [Calculate] 按忸，即可得到待测蛋白的实际含量。


9. 如果出现 , 可以调节相应的  值，即根据预测的 X 结果，选择附近的数值即可。


10. 如想得到 ELISA 拟合曲线的方程，可在步骤 6 的对话框空白处右击，选择「Information」，得到如下对话框：点击「Copy」。

11. 在你需要的位置粘贴即可得到如下数据：

MMF Model：y =(a*b+c*x^d)/(b+x^d)

Coefficient Data:

a = 5.02803575349E- 002

b = 3.54849086120E+ 002

c = 2.67845070065E+ 000

d = 1.19812203348E+ 000