可视细胞共培养实验的操作方法

在本方案中，我们将用于两种不同细胞类型的共培养。供体细胞和受体细胞可以单独生长，但共享相同的培养基以通过可溶性因子/蛋白质进行通讯。
 

1. 打开µ-Slide 2孔共培养载玻片的包装，并将其放在µ-Slide架子或其他合适的表面上。准备您的受体细胞，并使用40-60 µl细胞悬液将其接种到中央小孔中。根据您的细胞，我们建议5-10 x104 cell/ ml。

2. 准备您的供体细胞，并将其接种到外部小孔中，每孔使用40-60 µl细胞悬液。当使用ibiTreat（经过亲水性组织培养处理）表面时，外部8个孔之间可能会发生一些混合。不要用培养基润湿内孔的走道，并小心处理玻片，以免在细胞附着之前混合培养基。

3. 细胞附着后，清空各个孔溶液以防止细胞混合。用40-60 µl培养基洗涤9个小孔，以去除非贴壁细胞。之后，将400- 600 µl培养基填充到每个大孔中。这将连接9个小孔，从而允许两种细胞通过培养基进行通讯。

µ-Slide 2孔共培养载玻片还允许在凝胶基质内培养细胞球体，并与接种在外孔中的供体细胞结合。在下面的图片中，有一个多细胞球状体，例如内皮细胞嵌入胶原蛋白凝胶中。在中心小孔中生长的球状体可以在癌细胞附近培养，这些癌细胞可以释放出可溶性因子。像胶原I型凝胶这样的水性3D凝胶基质不会阻碍分子扩散。

与ibidi Culture-Insert 2孔一起进行2D共培养，ibidi Culture-Insert 2孔可用于将不同类型的细胞铺到一个培养容器中，彼此相邻。它仅用作在指定区域播种细胞的模具。去除培养插件后，不同的细胞类型会彼此紧邻而无障碍地生长。

µ-Slide共培养，可以创建单个细胞模式。根据所使用的板或培养皿，可以单独选择细胞数量和培养基体积。

在3D矩阵中共同培养细胞

ibidi micro-Insert 4孔提供了小孔，可以填充混合到3D凝胶基质中的细胞。这样，可以在共享一个液体的同时分别培养不同类型的悬浮或贴壁细胞。可以根据需要收集或交换，而无需将细胞冲洗出凝胶。